PEG20000 在免疫层析 (LF) 中的应用、选型与配方要点

聚乙二醇（Polyethylene Glycol，PEG）是环氧乙火完与水缩合得到的线性非离子型聚醚高分子，PEG20000 指数均分子量约 20000 Da的 PEG。在 IVD 领域，PEG 系列是 IVD 领域常用的高分子促凝、空间稳定试剂；低分子量 PEG（4000、6000、8000）多用于蛋白沉淀，PEG20000 高分子量版本在免疫层析体系，更多用于膜体系、样品垫 / 结合垫处理、标记物稳定、降低非特异吸附，区别于小分子 PEG 的单纯蛋白沉淀作用。

核心定位：高分子亲水柔性聚合物，免疫层析中兼顾空间位阻稳定 + 调节液相 / 膜相流体行为。

线性结构：HO-(CH₂CH₂O)_n-H

两端为羟基（-OH），主链重复单元是氧乙火希基-CH₂CH₂O-； PEG20000：重复单元 n≈450。

特点：无支链，柔性长链；两端羟基可进一步活化（如氨基化、巯基化），普通未修饰 PEG20000 为两端羟基，不带电荷。

1. 溶解性：易溶于水，溶于部分极性有机溶剂（乙醇等），不溶于乙酉迷、烃类；水溶液无色透明。

2. 电荷特性：非离子型，水溶液不带电，不受缓冲液 pH（常规 pH 6.0~9.0）、离子强度小幅波动影响。

3. 温敏特性：水溶液随浓度升高黏度显著上升；固态为白色蜡状固体，熔点约 58~63℃。

4. 生物特性：低免疫原性，蛋白相容性好；长链可提供显著的空间位阻效应，有助于抑制蛋白、纳米颗粒发生聚集。

5. 稳定性：干燥条件稳定；水溶液长期高温易氧化降解，产生醛基、过氧化物，会破坏标记蛋白 / 抗体，西宝生物（Seebio ACH0070A）IVD 级别PEG20000 具备较好的批次稳定性（具体性能以产品检验报告为准）。

参数	指标
标称分子量	20000 Da
分子量分布 PDI	≤1.10（IVD 优选窄分布）
熔点	58~63 ℃
水分	≤2.0 %
过氧化物（以 H2O2计）	≤5 ppm（核心质控项！高过氧化物会氧化抗体、荧光微球）
灰分	≤0.1 %
pH（5% 水溶液）	4.5~7.5
不溶物	无

免疫层析：胶体金、乳胶微球、荧光微球（时间分辨荧光、上转换荧光）侧向流试纸条。

1. 样品垫处理液（最常用） 样品垫玻璃纤维浸泡液，预处理膜材，改善样品释放、降低基质干扰、减少非特异性吸附。

2. 结合垫处理液 喷涂标记物（金标抗体 / 荧光微球抗体）前，先浸泡结合垫，修饰纤维表面；也可直接加入标记物复悬液。

3. 标记物保存液 / 复悬液 胶体金 / 荧光微球标记抗体后，封闭、重悬缓冲体系，稳定纳米标记颗粒，防止储存团聚。

4. 偶联封闭液（辅助） 标记完成后，和 BSA、Casein 搭配做封闭，替代部分蛋白封闭剂。

5. NC 膜预处理（少量配方） 极少场景，调节膜表面亲水性，一般不推荐高浓度 PEG 直接泡 NC 膜，易堵膜孔。

一般不用于 T 线 / C 线包被液：高浓度 PEG 会造成 NC 膜上抗体包被量下降，影响 T 线信号。

说明：以下配方仅为研发参考，不构成使用保证，需结合自身样本、标记物完成梯度实验验证。

1. 样品垫浸泡液：PEG20000 0.2~1.0 %（w/v） 参考配方： Tris-HCl 20 mM pH7.4 + 0.5% PEG20000 + 0.1% Tween20 + 0.5% BSA + 0.05% ProClin300

2. 结合垫浸泡液：PEG20000 0.1~0.5 %（w/v）

3. 标记物复悬液（金标 / 荧光微球）：PEG20000 0.05~0.3 %（w/v）

禁忌：不要高于 2% PEG20000。浓度过高会：溶液黏度急剧上升、层析流速变慢、NC 膜堵孔、信号压低、假阴性。

1. 空间位阻稳定：长 PEG 链吸附在纳米颗粒 / 蛋白表面，形成亲水保护层，能抑制胶体金、荧光微球在干燥、储存过程中聚集沉降，有助于减少胶体金、荧光微球干燥及储存过程中的聚集沉降现象，对试剂货架期表现有改善作用。

2. 降低非特异性吸附：亲水高分子覆盖玻璃纤维、NC 膜疏水位点，减少抗体、血清蛋白在膜上非特异结合，有助于降低试纸背景，有助于降低非特异性结合，进而减少假阳性风险。

3. 改善样品流动与释放：调节纤维表面亲水性，促进样品中靶标、标记物匀速释放，减少 “拖带、条带弥散”。

4. 基质干扰抑制：减少全血 / 血清中脂蛋白、大分子蛋白的共沉淀干扰，降低基质效应。

5. 辅助封闭：搭配蛋白封闭剂（BSA、酪蛋白）协同封闭，减少封闭蛋白用量。

1. 非离子高分子，pH 耐受范围宽，适配绝大多数免疫层析缓冲体系（pH6.0~9.0）。

2. 长链空间位阻优于低分子量 PEG，有助于改善荧光微球、纳米颗粒的储存稳定性，对试剂货架期表现有改善作用。

3. 低免疫原性，不干扰抗原抗体免疫结合反应，在合适的使用浓度下，PEG20000 免疫原性低，一般不易干扰抗原抗体识别与免疫结合反应）。

4. 协同降低非特异吸附，减少 BSA 等动物源蛋白用量，降低异源蛋白带来的批次差异。

5. 水溶性佳，配制简单，和常规缓冲体系相容性好。

6. 兼具调节流体行为能力，改善样品垫释放性能，缓解全血基质干扰。

7. 相比部分合成高分子封闭剂：对比部分合成高分子封闭剂，该原料行业应用广泛，成本适中；IVD企业内部具备较多项目验证数据积累，可实现稳定的批次供应。

1. 高浓度盐体系慎用：极高离子强度（>500mM）会降低 PEG 溶解度，高分子 PEG 易析出，造成膜堵。

2. 避免与强氧化剂共存：过氧化物、强氧化剂会氧化 PEG 链，产生醛基，破坏抗体，升高背景。

3. 不可与高浓度表面活性剂叠加过量：PEG + 高浓度 Tween 可协同增溶，但 Tween>0.5% + PEG20000>1% 易造成标记物解离、信号下降。

4. 不建议在 NC 膜包被液添加：PEG 会竞争性抑制抗体在硝酸纤维素膜上吸附，T 线强度显著下降。

5. 避免长时间高温灭菌：PEG 水溶液高温高压灭菌会加速氧化降解；配制缓冲液建议过滤除菌（0.22μm 滤膜）。

货号	中文品名	英文品名
ACH0144A	PEG 200	Polyethylene glycol 200
ACH0066C	PEG 400	Polyethylene glycol 400
ACH0146A	PEG 600	Polyethylene glycol 600
ACH0046A	PEG 1000	Polyethylene glycol 1000
ACH0037A	PEG 2000	Polyethylene glycol 2000
ACH0038A	PEG 3350	Polyethylene glycol 3350
ACH0039A	PEG 4000	Polyethylene glycol 4000
ACH0040A	PEG 6000	Polyethylene glycol 6000
ACH0042A	PEG 8000	Polyethylene glycol 8000
ACH0054A	PEG 10000	Polyethylene glycol 10000
ACH0070A	PEG 20000	Polyethylene glycol 20000

PEG20000 是侧向流开发一款非常实用的高分子工具，但不是 “全能添加剂”。

选对原料等级、控制好使用浓度、用对添加位置，它可以帮我们优化背景、改善标记物稳定性、减轻基质干扰；一旦用错，堵膜、掉信号、稳定性变差等问题也会接踵而至。
西宝生物深耕体外诊断领域多年，可为IVD项目提供原料供应、工艺优化与新项目协同开发等支持。覆盖高品质试剂原料供应、工艺与配方优化调试，以及新项目协同开发支持，从原料选型、配方迭代到项目落地，陪伴研发团队攻克开发难点，助力 IVD 项目高效推进。

免责声明：本文为体外诊断（IVD）领域技术科普与原料产品信息介绍，文中关于PEG原料性能、作用效果及配方建议，仅基于公开资料与产品说明，仅供技术交流与研发参考，不构成对任何产品性能、检测结果的保证或承诺。文中配方需结合自身体系验证后使用，具体产品性能以正式检验报告及合同约定为准。