DSS小鼠结肠炎模型构建全流程详解

硫酸葡聚糖钠（Dextran Sulfate Sodium，DSS）诱导小鼠溃疡性结肠炎是炎症性肠病（IBD）领域经典体内动物模型。该模型构建主要原理是 DSS 破坏结肠上皮黏膜屏障，促使肠道菌群侵入固有层，激活固有免疫与适应性免疫，诱发结肠局部急性 / 慢性炎症、黏膜糜烂出血、肠组织缩短水肿，高度模拟人类溃疡性结肠炎（UC）腹痛、腹泻、黏液脓血便、肠道慢性损伤与屏障破损核心病理特征。

实验准备（方案仅供参考）

模型类型	推荐品系	周龄体重
急性结肠炎	C57BL/6J	6\8周，18~22g
基础饲养：SPF级环境，12h明暗循环，常规辐照饲料、无菌饮水，适应性驯养7d，每日更换垫料，剔除体弱、体重偏差过大个体，按体重分层随机分组，单笼标记耳号区分个体。

无菌水溶解DSS粉末，0.22~0.45μm滤膜过滤除菌，4℃避光冷藏，注：每48h更换新鲜溶液，禁止长期存放；

①轻度急性炎症：1.5%~2%DSS

②中度标准造模：2.5%~3%DSS

③重度急性损伤：4%~5%DSS

单笼参考用量：4~5只小鼠每笼单次配制100mL，单鼠日均饮水约5mL，按需扩增体积。

2. 其他辅助试剂：如粪便隐血检测试纸、4%多聚甲醛固定液、PBS、DAI评分记录表、解剖器械、游标卡尺、电子天平等。

（三）组别设计（每组样本量n≥6只，建议n=8~10只）

1、空白对照组：全程无菌纯水饮用，每日等量溶剂灌胃；

2、DSS模型组：DSS饮水+等量溶剂灌胃；

Day0（造模前1d）：全部小鼠称重作为基线、采集粪便、记录基础状态，随机分组编号；

Day1~Day7：模型及给药组自由饮用3%DSS无菌水溶液，空白组正常饮水；每2d彻底更换全新DSS溶液，防止降解污染；

每日固定时间记录：体重降幅、粪便性状、隐血结果，计算DAI疾病活动指数；

Day7终点：腹腔麻醉（Nembutal）脱颈处死，完整分离结肠组织，沿肠系膜纵向剪开、生理盐水冲洗肠内容物，测量结肠总长度，称重脾脏；结肠分段固定用于病理、分子生物学检测。

评分	体重下降	粪便性状	便血情况
0	无下降	成型硬便	无隐血/肉眼血便
1	下降1%~5%	轻度松散便	隐血试纸弱阳性
2	下降6%~10%	稀软半成型便	隐血强阳性
3	下降11%~15%	完全腹泻水样便	肉眼可见鲜血便
4	＞15%	失禁腹泻	大量肉眼血便
DAI单日得分=三项指标平均分，连续累计统计，模型组DAI稳定＞2判定造模成功。

①结肠长度：空白组正常C57BL/6小鼠结肠约7\8cm，模型组通常缩短1.5\3cm；

②脾脏脏器系数：脾脏湿重/小鼠体重，炎症刺激下脾脏代偿肿大，系数显著升高；

③肠黏膜肉眼观察：充血水肿、糜烂溃疡、肠腔粘连、内容物脓血附着。

1、HE染色病理切片：病理评分依据黏膜缺损深度、炎症细胞浸润范围、隐窝破坏程度来评估全结肠损伤情况。

2、分子水平：结肠组织qPCR/WB检测促炎因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-17；紧密连接蛋白ZO-1、Occludin；炎症小体NLRP3、Caspase-1等指标。

1、出现造模成功率低、个体差异大的现象

原因分析：DSS溶液过期未更换、饮水瓶漏水、小鼠品系混杂、饲养环境应激；

解决方案：严格48h换液，选用同批次雄性C57BL/6，饲养环境避光降噪。

2、如果出现小鼠批量死亡

原因分析：多为DSS浓度过高（＞5%）或造模时长超9d，体重骤降超25%需提前终止实验安乐。

3、给药方式禁忌

严禁以腹腔/尾静脉注射DSS，仅结肠局部接触给药（自由饮水）为标准方式，注射会造成全身毒性且无法靶向肠道造模。

产品货号	产品名称	包装规格
DCJ0105A（HOT）	Seebio®硫酸葡聚糖钠盐 36,000~50,000（DSS）	25g/100g/500g
DCJ1606A	Seebio®硫酸葡聚糖钠盐40,000（DSS）	25g/100g/500g
DCJ1606D	Seebio®硫酸葡聚糖钠盐 40,000（DSS），低内毒素	25g/100g/500g

产品名称	货号	应用
链脲佐菌素	DCG0032A
脂多糖LPS	EKY0382A	神经炎症
卵清蛋白	DCL0003A	过敏性哮喘
胶原酶II型	DBX1519	骨关节炎
异丙肾上月泉素	DBY1830A	心力衰竭
血管紧张素II	EBX2023	心肌肥厚
腺嘌呤Adenine	ACI0008A	慢性肾脏病
D-半乳糖胺	DBX1518	肝病

【1】Whittem CG, Williams AD, Williams CS. Murine Colitis modeling using Dextran Sulfate Sodium (DSS). J Vis Exp. 2010 Jan 19;(35):1652. doi: 10.3791/1652.

【2】Das S, Batra SK, Rachagani S. Mouse Model of Dextran Sodium Sulfate (DSS)-induced Colitis. Bio Protoc. 2017 Aug 20;7(16):e2515. doi: 10.21769/BioProtoc.2515. PMID: 34541176