甲胎蛋白（AFP）-磁微粒化学发光法（AE/AP） /荧光免疫层析解决方案

甲胎蛋白（Alpha-Fetoprotein，AFP）是一种胚胎源性糖蛋白，主要在胎儿发育早期由肝脏和卵黄囊大量合成。随着胎儿出生，AFP的基因表达受到严格抑制，其血清浓度迅速下降至极低水平。在正常成年人体内，AFP含量微乎其微，因此血清AFP出现异常升高时，通常提示肝细胞处于异常增殖状态或存在恶变风险。当肝细胞发生癌变时，AFP由肝癌细胞再次分泌产生，当血清中AFP含量＞400ng/mL时，诊断原发性肝癌的阳性率可达60%-80%，因此AFP测定是诊断原发性肝癌的一个特异性指标，还可以用于肝癌的治疗效果及预后评估。当AFP＞500ng/mL时，患者的存活期缩短，如果手术治疗后AFP一周内降至正常，提示预后良好，如果下降后又升高，则有可能是肝癌复发。当然AFP不升高也不能排除肝癌，要结合其他检查如影像学检查以及临床症状进行综合判断。

除肝癌以外，酒精性肝炎、肝硬化、病毒性肝炎等一些造成肝脏损伤的疾病也会造成AFP升高，但一般会在400ng/mL以下。这些疾病人群属于肝癌高危人群，应该定期进行AFP筛查。怀孕时AFP也会升高，分娩后3周左右恢复正常。部分生殖系统的肿瘤也会引起AFP升高。

WS/T 645.2—2026《临床常用免疫学检验项目参考区间第2部分：血清甲胎蛋白、癌胚抗原、糖链抗原19-9、糖链抗原15-3、糖链抗原125》指出中国18岁～79岁成人血清甲胎蛋白的参考区间≤7ng/mL。

序号	公司	检测平台	样品类型	检测范围	检出限	HOOK浓度
1	罗氏诊断	电化学发光	血液	0.605-1210ng/mL	0.605ng/mL	1210000ng/mL
2	西门子诊断	磁微粒化学发光	血液	1.3-1000ng/mL	1.3ng/mL	460000ng/mL
3	贝克曼诊断	磁微粒化学发光	血液	0.5-3000ng/mL	0.5ng/mL	500000ng/mL

具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）。

线性范围：0.5ng/mL-1210ng/mL；最低检出限：0.5ng/mL。HOOK：1210000ng/mL。

线性范围：0.5ng/mL-1210ng/mL；最低检出限：0.5ng/mL。HOOK：1210000ng/mL。

线性范围：2ng/mL-500ng/mL；最低检出限：2ng/mL。HOOK：1210000ng/mL。

2.4.1采用AFP磁珠标记物稀释液（货号：DCD0567A）将磁珠包被的AFP抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.2采用AFP吖啶酯标记物稀释液（货号：DCD0566B）将吖啶酯标记的AFP抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.3采用AFP AP酶标记物稀释液（货号：DCD0535A）将碱性磷酸酶标记的AFP抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.4采用链霉亲和素（SA）稀释液（货号：DCD0566B）将SA磁珠浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.5采用AFP生物素标记物稀释液（货号：DCD0566B）将生物素标记的AFP抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.6采用AFP抗原稀释液（货号：DCD0566E）将AFP抗原配制成梯度进行37℃热稳定性实验；

a.磁珠包被AFP抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明磁珠包被AFP抗体工作液热稳定性良好；

b.吖啶酯标记AFP抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明吖啶酯标记AFP抗体工作液热稳定性良好；

c.碱性磷酸酶标记AFP抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明碱性磷酸酶标记AFP抗体工作液热稳定性良好；

d.SA磁珠单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明SA磁珠的热稳定性良好。

e.AFP生物素单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明AFP生物素热稳定性良好。

f.AFP抗原梯度（液体型）单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%左右，表明AFP抗原（液体型）梯度热稳定性良好。

序号	AFP抗原稀释浓度 （ng/mL）	磁珠-包被AFP抗体工作液37℃热加速7天变化	吖啶酯-标记AFP工作液37℃热加速7天变化	AP酶-标记AFP工作液37℃热加速7天变化	SA磁珠工作液37℃热加速7天变化	生物素标记AFP抗体工作液37℃热加速7天变化	AFP抗原梯度 （液体型）37℃热加速7天变化
S0	0	3.4%	2.5%	3.2%	2.5%	2.8%	5.3%
S1	1	-2.2%	-1.7%	7.2%	2.2%	1.2%	-7.1%
S2	5	3.2%	7.2%	4.0%	-2.4%	2.5%	-7.8%
S3	20	4.1%	6.7%	9.3%	3.7%	9.5%	-5.6%
S4	100	4.2%	-3.0%	7.8%	-0.6%	5.4%	-8.0%
S5	500	5.3%	-1.4%	4.8%	-2.1%	10.1%	-6.3%
S6	1500	8.4%	-7.0%	5.7%	-2.0%	5.4%	-1.5%
平均变化 （不含S0）		3.8%	0.1%	6.5%	-0.2%	5.7%	-6.0%

3.1.1西宝生物发光（AE）平台皮AFP原料配对组合1与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

3.1.2西宝生物发光（AE）平台皮AFP原料配对组合2与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

3.2.1西宝生物发光（AP）平台皮AFP原料配对组合3与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

3.2.2西宝生物发光（AP）平台皮AFP原料配对组合4与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

西宝生物荧光免疫层析平台AFP原料配对组合5与罗氏的AFP试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95左右，相关性良好。

4.1.1 AFP抗体配对组合1（两试剂模式）

待测抗原:AFP抗原（货号：EDD0914B）；

样本:样品加样量10ul；

试剂1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

第一步：10ul样本+50ul试剂1，37℃孵育5min，清洗；

第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。

待测抗原AFP抗原（货号：EDD0914B）；

样本:样品加样量10ul；

M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量100ul/测试；

试剂1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记-生物素稀释物，用量100ul/测试；

试剂2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记-吖啶酯稀释物，用量100ul/测试；

第一步：10ul样本+100ul M试剂+100ul试剂1，37℃孵育5min，清洗；

第二步：加入100ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。

待测抗原:AFP抗原（货号：EDD0914B）；

样本:样品加样量10ul；

试剂1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被-磁珠稀释物，用量100ul/测试；

试剂2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量100ul/测试；

第一步：10ul样本+100ul试剂1，37℃孵育5min，清洗；

第二步：加入100ul试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入底物，进行测试。

待测抗原:AFP抗原（货号：EDD0914B）；

样本:样品加样量10ul；

M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量100ul/测试；

试剂1：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记-生物素稀释物，用量100ul/测试；

试剂2：甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量100ul/测试；

第一步：10ul样本+100ul M试剂+100ul试剂1，37℃孵育5min，清洗；

第二步：加入100ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入底物，进行测试。

待测抗原:AFP抗原（货号：EDD0914B）；

反应条件：10ul样品+800ul稀释液混匀，上样，反应时间（10min-15min）；

产品名称	货号	推荐配对
甲胎蛋白（AFP）抗体	EKY0006A	AFP配对： 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被羧基磁珠+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记吖啶酯；（发光配对组合1） 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记生物素+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）（发光配对组合2） 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被羧基磁珠+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记碱性磷酸酶；（发光配对组合3） 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记生物素+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；（发光配对组合4） 甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记荧光微球+甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）划膜；（荧光配对组合5）
甲胎蛋白（AFP）抗体	EKY0006B
甲胎蛋白抗原（AFP）	EDD0914B
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）包被羧基磁珠浓缩液	DKY1390A
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记生物素浓缩液	DKY1390B
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记吖啶酯浓缩液	DKY1390C
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006B）标记碱性磷酸酶浓缩液	DKY1390D
甲胎蛋白（AFP）抗体（货号：EKY0006A）标记荧光微球浓缩液	DKY1390E
化学发光底物AMPPD干粉	DCD0721B
AMPPD 发光底物液（即用型）	DCD0517B
APS-5 发光底物液（即用型）	ECD0532M
羧基磁性微球，1um	DEG0852A
重组碱性磷酸酶（高活性）	DCE0108L
链霉亲和素磁性微球，1.5um	DEG0814A
时间分辨荧光微球，羧基（300nm）	AEG0789C
AFP抗体磁珠标记物稀释液	DCD0567A
AFP抗体抗原稀释液	DCD0566E
AFP抗体生物素标记物稀释液	DCD0566B
AFP抗体吖啶酯标记物稀释液	DCD0566B
AFP抗体AP标记物稀释液	DCD0535A
链霉亲和素（SA）磁珠稀释液	DCD0566B