胰岛素（Insulin）-磁微粒化学发光法（AE/AP） /荧光免疫层析解决方案

胰岛素（Insulin）是由胰腺胰岛β细胞分泌的降血糖多肽激素，由51个氨基酸组成，分子量约5.8kDa。其前体为胰岛素原，经酶切后生成等量胰岛素与C肽，释放入血发挥生理作用。

胰岛素检测（空腹/餐后/释放试验）是评估胰岛β细胞功能、诊断糖尿病分型、判断胰岛素抵抗及排查低血糖/胰岛素瘤的核心项目，常用化学发光免疫法（CLIA）检测，单位为mIU/L（μU/mL）或pmol/L。

序号	公司	检测平台	样品类型	检测范围	检出限	HOOK浓度
1	罗氏诊断	电化学发光	血液	0.2-1000μU/mL	0.2μU/mL	20000μU/mL
2	西门子诊断	磁微粒化学发光	血液	0.5-300.0mU/L	0.5mU/L	3000mU/L
3	雅培诊断	磁微粒化学发光	血液	1-300μU/mL	1μU/mL	15000μU/mL

具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）。

线性范围：0.5μU/mL-300μU/mL；最低检出限：0.5μU/mL。HOOK：20000μU/mL。

线性范围：0.5μU/mL-300μU/mL；最低检出限：0.5μU/mL。HOOK：20000μU/mL。

线性范围：2μU/mL-300μU/mL；最低检出限：2μU/mL。HOOK：20000μU/mL。

2.4.1采用胰岛素磁珠标记物稀释液（货号：DCD0567A）将磁珠包被的胰岛素抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.2采用胰岛素吖啶酯标记物稀释液（货号：DCD0567A）将吖啶酯标记的胰岛素抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.3采用胰岛素 AP酶标记物稀释液（货号：DCD0535A）将碱性磷酸酶标记的胰岛素抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.4采用胰岛素抗原稀释液（货号：DCD0566E）将胰岛素抗原配制成梯度进行37℃热稳定性实验；

如表1所示：

a.磁珠包被胰岛素抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明磁珠包被胰岛素抗体工作液热稳定性良好；

b.吖啶酯标记胰岛素抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明吖啶酯标记胰岛素抗体工作液热稳定性良好；

c.碱性磷酸酶标记胰岛素抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明碱性磷酸酶标记胰岛素抗体工作液热稳定性良好；

d.胰岛素抗原梯度（液体型）单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±15%以内，表明胰岛素抗原（液体型）梯度热稳定性良好。

序号	胰岛素抗原稀释浓度（μU/mL）	磁珠-包被胰岛素抗体工作液37℃热加速7天变化	吖啶酯-标记胰岛素工作液37℃热加速7天变化	AP酶-标记胰岛素工作液37℃热加速7天变化	胰岛素抗原梯度（液体型）37℃热加速7天变化
S0	0	-3.7%	-4.2%	-1.8%	-3.2%
S1	0.5	-3.3%	-11.3%	-1.4%	-8.9%
S2	2	-4.1%	-9.1%	2.9%	-14.5%
S3	10	7.1%	-7.7%	6.2%	-12.4%
S4	50	7.7%	-4.6%	6.4%	-12.2%
S5	100	2.5%	-12.5%	2.9%	-10.0%
S6	500	1.9%	-9.1%	4.1%	-7.5%
平均变化（不含S0）		2.0%	-9.0%	4.5%	-10.9%

西宝生物发光（AE）平台皮胰岛素原料配对组合1与罗氏的胰岛素试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

西宝生物发光（AP）平台皮胰岛素原料配对组合2与罗氏的胰岛素试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

西宝生物荧光免疫层析平台胰岛素原料配对组合5与罗氏的胰岛素试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95左右，相关性良好。

待测抗原:胰岛素抗原（货号：EJL0684B）；

样本:样品加样量20ul；

试剂1：胰岛素抗体2（货号：EKY0705B）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：胰岛素抗体1（货号：EKY0705A）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

第一步：20ul样本+50ul试剂1+50ul 试剂2，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入预激发液及激发液，进行测试。

待测抗原:胰岛素抗原（货号：EJL0684B）；

样本:样品加样量20ul；

试剂1：胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；

第一步：20ul样本+50ul试剂1+50ul试剂2，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入底物，进行测试。

反应条件：10ul样品+100ul稀释液混匀，上样，反应时间（10min-15min）；

产品名称	货号	推荐配对
胰岛素抗体	EKY0705A	胰岛素配对： 胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被羧基磁珠+胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记吖啶酯；（发光配对组合1） 胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被羧基磁珠+胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记碱性磷酸酶；（发光配对组合2） 胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记荧光微球+胰岛素抗体（货号：EKY0705B）划膜； （荧光配对组合3）
胰岛素抗体	EKY0705B
胰岛素抗原	EJL0684B
胰岛素抗体（货号：EKY0705B）包被羧基磁珠浓缩液	DKY1389A
胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记吖啶酯浓缩液	DKY1389B
胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记碱性磷酸酶浓缩液	DKY1389C
胰岛素抗体（货号：EKY0705A）标记荧光微球浓缩液	DKY1389D
AMPPD 发光底物液（即用型）	DCD0517B
APS-5 发光底物液（即用型）	ECD0532M
羧基磁性微球，1um	DEG0852A
重组碱性磷酸酶（高活性）	DCE0108L
链霉亲和素磁性微球，1.5um	DEG0814A-10ml
时间分辨荧光微球，羧基（300nm）	AEG0789C
胰岛素抗体磁珠标记物稀释液	DCD0567A
胰岛素抗体抗原稀释液	DCD0566E
胰岛素抗体吖啶酯标记物稀释液	DCD0567A
胰岛素抗体AP标记物稀释液	DCD0535A