C肽（C-Peptide）-磁微粒化学发光法（AE/AP） /荧光免疫层析解决方案

摘自《C肽测定试剂注册技术审查指导原则（2025年修订版）（征求意见稿）》

C肽（C-Peptide）又称连接肽，是胰岛β细胞的分泌产物，它与胰岛素有一个共同的前体─胰岛素原。一个分子的胰岛素原经酶切后，裂解成一个分子的胰岛素和一个分子的C肽。C肽本身无生物活性，由于胰岛素和C肽是以等摩尔浓度分泌的，进入血液后，大部分胰岛素经肝脏被灭活，而C肽被肝脏摄取很少，加上C肽降解速度比胰岛素慢，所以血液中C肽浓度比胰岛素高，一般在5倍以上，故C肽更能准确反映胰岛β细胞的功能。因此测定血液中C肽水平可作为胰岛β细胞分泌功能的重要指标，特别对用外源性胰岛素治疗的糖尿病人更需要测定其C肽，因胰岛素制剂中不含C肽，不影响患者血液中C肽的水平。

C肽水平测定可应用于糖尿病分型及了解糖尿病患者胰岛β细胞的功能。无论1型或2型糖尿病患者，初病时都应通过检测C肽或胰岛素水平以判断胰岛β细胞功能。

序号	公司	检测平台	样品类型	检测范围	检出限	HOOK浓度
1	罗氏诊断	电化学发光	血液	0.01-40ng/mL	0.01ng/mL	180ng/mL
2	西门子诊断	磁微粒化学发光	血液	0.05-30ng/mL	0.05ng/mL	125ng/mL

具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）。

线性范围：0.05ng/mL-40ng/mL；最低检出限：0.05ng/mL。HOOK：200ng/mL。

线性范围：0.05ng/mL-40ng/mL；最低检出限：0.05ng/mL。HOOK：200ng/mL。

线性范围：0.05ng/mL-40ng/mL；最低检出限：0.05ng/mL。HOOK：200ng/mL。

2.4.1采用C肽磁珠标记物稀释液（货号：DCD0566A）将磁珠包被的C肽抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.2采用C肽吖啶酯标记物稀释液（货号：DCD0566A）将吖啶酯标记的C肽抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.3采用C肽 AP酶标记物稀释液（货号：DCD0535A）将碱性磷酸酶标记的C肽抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.4采用链霉亲和素（SA）稀释液（货号：DCD0566D）将SA磁珠浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.5采用C肽生物素标记物稀释液（货号：DCD0566A）将生物素标记的C肽抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.6采用C肽抗原稀释液（货号：DCD0566E）将C肽抗原配制成梯度进行37℃热稳定性实验；

如表1所示：

a.磁珠包被C肽抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明磁珠包被C肽抗体工作液热稳定性良好；

b.吖啶酯标记C肽抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明吖啶酯标记C肽抗体工作液热稳定性良好；

c.碱性磷酸酶标记C肽抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明碱性磷酸酶标记C肽抗体工作液热稳定性良好；

d.SA磁珠单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明SA磁珠的热稳定性良好。

d.C肽生物素单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明C肽生物素热稳定性良好。

e.C肽抗原梯度（液体型）单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%左右，表明C肽抗原（液体型）梯度热稳定性良好。

序号	C肽抗原稀释浓度（ng/mL）	磁珠-包被C肽抗体工作液37℃热加速7天变化	吖啶酯-标记C肽工作液37℃热加速7天变化	AP酶-标记C肽工作液37℃热加速7天变化	SA磁珠工作液37℃热加速7天变化	生物素标记C肽抗体工作液37℃热加速7天变化	C肽抗原梯度（液体型）37℃热加速 7天变化
S0	0	-5.8%	-4.1%	1.6%	2.4%	7.2%	-0.9%
S1	0.1	-2.4%	-11.3%	6.7%	5.1%	9.0%	4.8%
S2	0.5	4.1%	-11.7%	6.3%	1.2%	9.7%	5.4%
S3	2	-1.6%	-9.2%	5.6%	0.2%	8.5%	-5.1%
S4	10	-4.7%	-12.2%	5.1%	-0.2%	3.5%	6.1%
S5	40	-5.3%	-12.8%	2.5%	-1.9%	5.7%	1.5%
平均变化 （不含S0）		-2.0%	-10.2%	5.2%	0.5%	7.3%	2.5%

3.1.1西宝生物发光（AE）平台皮C肽原料配对组合1与罗氏的C肽试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

3.1.2西宝生物发光（AE）平台皮C肽原料配对组合2与罗氏的C肽试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

3.2.1西宝生物发光（AP）平台皮C肽原料配对组合3与罗氏的C肽试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

3.2.2西宝生物发光（AP）平台皮C肽原料配对组合4与罗氏的C肽试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95，相关性良好；

西宝生物荧光免疫层析平台C肽原料配对组合5与罗氏的C肽试剂（电化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.95左右，相关性良好。

待测抗原:C肽抗原（货号：EDD0451B）；

样本:样品加样量50ul；

试剂1：C肽抗体（货号：EKY0706G）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：C肽抗体（货号：EKY0706H）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

第一步：50ul样本+50ul试剂1+50ul 试剂2，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入预激发液及激发液，进行测试。

待测抗原C肽抗原（货号：EDD0451B）；

样本:样品加样量50ul；

M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量50ul/测试；

试剂1：C肽抗体（货号：EKY0706G）标记-生物素稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：C肽抗体（货号：EKY0706H）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

第一步：50ul样本+50ul M试剂+50ul试剂1，37℃孵育10min；

第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育10min，清洗；

第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。

待测抗原:C肽抗原（货号：EDD0451B）；

样本:样品加样量20ul；

试剂1：C肽抗体（货号：EKY0706C）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：C肽抗体（货号：EKY0706D）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；

第一步：20ul样本+50ul试剂1+50ul试剂2，37℃孵育10min，清洗；

第二步：加入底物，进行测试。

待测抗原:C肽抗原（货号：EDD0451B）；

样本:样品加样量20ul；

M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量50ul/测试；

试剂1：C肽抗体（货号：EKY0706C）标记-生物素稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：C肽抗体（货号：EKY0706D）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；

第一步：20ul样本+50ul M试剂+50ul试剂1，37℃孵育10min；

第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入底物，进行测试。

待测抗原:C肽抗原（货号：EDD0451B）；

反应条件：10ul样品+100ul稀释液混匀，上样，反应时间（10min-15min）；

产品名称	货号	推荐配对
Human C-Peptide (C-P) C肽抗体	EKY0706C	C肽配对： C肽抗体（货号：EKY0706G）包被羧基磁珠+C肽抗体（货号：EKY0706H）标记吖啶酯；（发光配对组合1） C肽抗体（货号：EKY0706G）标记生物素+C肽抗体（货号：EKY0706H）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）（发光配对组合2） C肽抗体（货号：EKY0706C）包被羧基磁珠+C肽抗体（货号：EKY0706D）标记碱性磷酸酶；（发光配对组合3） C肽抗体（货号：EKY0706C）标记生物素+C肽抗体（货号：EKY0706D）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；（发光配对组合4） C肽抗体（货号：EKY0706D）标记荧光微球+C肽抗体（货号：EKY0706C）划膜；（荧光配对组合5）
Human C-Peptide (C-P) C肽抗体	EKY0706D
Human C-Peptide (C-P) C肽抗体	EKY0706H
Human C-Peptide (C-P) C肽抗体	EKY0706G
C-Peptide C肽抗原	EDD0451B
C肽抗体（货号：EKY0706G）包被羧基磁珠浓缩液	DKY1388A
C肽抗体（货号：EKY0706C）包被羧基磁珠浓缩液	DKY1388B
C肽抗体（货号：EKY0706G）标记生物素浓缩液	DKY1388C
C肽抗体（货号：EKY0706C）标记生物素浓缩液	DKY1388D
C肽抗体（货号：EKY0706H）标记吖啶酯浓缩液	DKY1388E
C肽抗体（货号：EKY0706D）标记碱性磷酸酶浓缩液	DKY1388F
C肽抗体（货号：EKY0706D）标记荧光微球浓缩液	DKY1388G
化学发光底物AMPPD干粉	DCD0721B
AMPPD 发光底物液（即用型）	DCD0517B
APS-5 发光底物液（即用型）	ECD0532M
羧基磁性微球，1um	DEG0852A
重组碱性磷酸酶（高活性）	DCE0108L
链霉亲和素磁性微球，1.5um	DEG0814A
时间分辨荧光微球，羧基（300nm）	AEG0789C
C肽抗体磁珠标记物稀释液	DCD0566A
C肽抗体抗原稀释液	DCD0566E
C肽抗体生物素标记物稀释液	DCD0566A
C肽抗体吖啶酯标记物稀释液	DCD0566A
C肽抗体AP标记物稀释液	DCD0535A
链霉亲和素（SA）磁珠稀释液	DCD0566D