皮质醇（Cortisol）-磁微粒化学发光法（AE/AP） /荧光免疫层析解决方案

皮质醇，常被称为“压力激素”，是人体肾上腺皮质分泌的最重要的糖皮质激素。它作为下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的核心终末产物，广泛参与调节机体新陈代谢、应激反应、免疫功能、血压和昼夜节律等几乎所有的生理过程。其水平的精确评估，对于诊断库欣综合征（皮质醇增多症）、肾上腺皮质功能减退症等一系列内分泌及全身性疾病至关重要。

皮质醇由肾上腺皮质的束状带合成与分泌。作为一种类固醇激素，其生理作用广泛而深入：代谢调节、应激反应、免疫调节、其他作用。

皮质醇的分泌并非恒定，主要受HPA轴精密调控，并呈现两个显著特征：昼夜节律及应激性分泌。

在血液循环中，约90%的皮质醇与皮质醇转运球蛋白结合，少量与白蛋白结合，仅少数游离皮质醇具有生物活性。CBG水平的变化（如妊娠、服用雌激素药物时升高，肝硬化、肾病综合征时降低）会影响总皮质醇的测定值，但不影响游离皮质醇水平。

检测皮质醇水平主要用于评估HPA轴功能，其异常与多种疾病状态相关。

主要疾病：病理性升高最常见于库欣综合征，即各种原因（如垂体ACTH瘤、肾上腺腺瘤或异位ACTH综合征）导致的长期皮质醇过多。典型临床表现包括向心性肥胖、满月脸、水牛背、皮肤紫纹、高血压、高血糖、肌肉无力及骨质疏松等。

主要疾病：病理性降低主要提示肾上腺皮质功能减退症。

1.3.1 NICE指南的证据综述表明，晨间血清皮质醇在筛查继发性肾上腺皮质功能减退时，其敏感性和特异性在特定阈值下能达到临床可接受的水平。例如，一项研究显示，以260 nmol/L为阈值，诊断的敏感性为0.73，特异性为0.72。

1.3.2 指南特别强调了避免单一随机皮质醇检测的做法，因为其结果受昼夜节律和应激影响极大，解读困难，容易导致不必要的转诊。

1.3.3 除了血清检测，指南也纳入了唾液皮质醇和皮质酮作为有价值的筛查工具，特别是对于门诊或家庭监测的患者。

针对皮质醇（Cortisol）的检测，西宝生物推出1株Cortisol抗体、1株Cortisol抗原-BSA及1款Cortisol标准品。

具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）。

线性范围：0.1μg/dL-60μg/dL；最低检出限：0.1μg/dL。

线性范围：0.1μg/dL-60μg/dL；最低检出限：0.1μg/dL。

线性范围：2μg/dL-60μg/dL；最低检出限：2μg/dL。

2.4.1 采用皮质醇磁珠稀释液（货号：DCD0566B）将磁珠包被的皮质醇浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.2 采用皮质醇吖啶酯稀释液（货号：DCD0566C）；含复合酶保护剂AFP（货号：ACE0074A）将吖啶酯标记的皮质醇-BSA浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.3 采用皮质醇碱性磷酸酶稀释液（货号：DCD0566D；含蛋白保护剂GH（货号：DCL0009A），或者含（酶解深水鱼皮明胶（货号：ACH0085J）将碱性磷酸酶标记的皮质醇-BSA浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.4 采用SA稀释液（货号：DCD0566B）将SA磁珠浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.5 采用皮质醇生物素稀释液（货号：DCD0566B）将生物素标记的皮质醇抗体浓缩液配制成工作液进行37℃热稳定性实验；

2.4.6 采用皮质醇标准品稀释液（货号：DCD0566E）将皮质醇标准品配制成梯度进行37℃热稳定性实验；

如表1所示：

a.磁珠包被皮质醇抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明磁珠包被皮质醇抗体工作液热稳定性良好；

b.吖啶酯标记皮质醇-BSA工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±15%左右，表明吖啶酯标记皮质醇-BSA工作液热稳定性良好；

c.碱性磷酸酶标记皮质醇-BSA工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明碱性磷酸酶标记皮质醇抗体工作液热稳定性良好；

d.SA磁珠单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明SA磁珠的热稳定性良好。

e.皮质醇生物素单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明皮质醇生物素热稳定性良好。

f.皮质醇标准品梯度单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内，表明皮质醇标准品梯度热稳定性良好。

序号	皮质醇标准品稀释浓度（ug/dL）	磁珠-包被皮质醇抗体工作液37℃热加速 7天变化	吖啶酯-标记皮质醇-BSA工作液37℃热加速 7天变化	AP酶-标记皮质醇-BSA工作液37℃热加速 7天变化	SA磁珠工作液37℃热加速 7天变化	生物素标记皮质醇抗体工作液37℃热加速 7天变化	皮质醇标准品37℃热加速 7天变化
S0	0	4.8%	-10.1%	1.3%	7.2%	1.2%	4.0%
S1	0.05	-1.3%	-13.3%	1.4%	9.8%	0.9%	5.5%
S2	0.2	7.0%	-14.0%	0.3%	8.9%	-4.4%	7.8%
S3	1	1.1%	-13.8%	0.0%	9.1%	2.4%	7.4%
S4	5	8.1%	-16.6%	-7.8%	7.5%	-2.3%	3.5%
S5	50	6.1%	-15.5%	-6.7%	2.5%	-2.4%	7.6%
S6	100	5.9%	-15.9%	-8.3%	3.2%	2.4%	4.2%
平均变化 （不含S0）		4.5%	-14.2%	-2.8%	6.9%	-0.5%	6.0%

3.1.1西宝生物发光（AE）平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合1与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.90，相关性良好；

3.1.2西宝生物发光（AE）平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合2与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R²在0.95左右，相关性良好；

3.2.1西宝生物发光（AP）平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合3与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.90，相关性良好；

3.2.2西宝生物发光（AP）平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合4与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R²＞0.90，相关性良好；

西宝生物荧光免疫层析平台皮质醇（Cortisol）原料配对组合5与安图生物的皮质醇试剂（磁微粒化学发光法）赋值的临床样本相关性R²在0.95左右，相关性良好。

4.1.1 皮质醇原料配对组合1（两试剂模式）

待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；

样本:样品加样量20ul；

试剂1：皮质醇抗体（货号：EKY0956B）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：皮质醇抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

第一步：20ul样本+50ul试剂1，37℃孵育5min；

第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第二步：加入预激发液及激发液，进行测试。

待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；

样本:样品加样量20ul；

M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量50ul/测试；

试剂1：皮质醇抗体（货号：EKY0956B）标记-生物素稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：皮质醇抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；

第一步：20ul样本+50ul M试剂+50ul试剂1，37℃孵育5min；

第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。

待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；

样本:样品加样量20ul；

试剂1：皮质醇抗体（货号：EKY0956B）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：皮质醇抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；

第一步：20ul样本+50ul试剂1，37℃孵育10min；

第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第二步：加入底物，进行测试。

待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；

样本:样品加样量20ul；

M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量50ul/测试；

试剂1：皮质醇抗体（货号：EKY0956B）标记-生物素稀释物，用量50ul/测试；

试剂2：皮质醇抗原-BSA（货号：EKY0955B）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；

第一步：20ul样本+50ul M试剂+50ul试剂1，37℃孵育10min；

第二步：加入50ul 试剂2，37℃孵育5min，清洗；

第三步：加入底物，进行测试。

待测抗原:皮质醇标准品（货号：DKY0348A）；

反应条件：10ul样品+100ul稀释液混匀，上样，反应时间（10min-15min）；

产品名称	货号	推荐配对
皮质醇（Cortisol）抗体	EKY0956B	皮质醇配对： 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）包被羧基磁珠+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记吖啶酯；（发光配对组合1） 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）标记生物素+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）（发光配对组合2） 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）包被羧基磁珠+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记碱性磷酸酶；（发光配对组合3） 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）标记生物素+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；（发光配对组合4） 皮质醇（Cortisol）抗体（货号：EKY0956A）标记荧光微球+皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）划膜；（荧光配对组合5）
皮质醇（Cortisol）抗原-BSA	EKY0955B
皮质醇（Cortisol）标准品	DKY0348A
皮质醇（Cortisol）抗体（货号：）包被羧基磁珠浓缩液	DKY1387A
皮质醇（Cortisol）抗体（货号：）标记生物素浓缩液	DKY1387B
皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记吖啶酯浓缩液	DKY1387C
皮质醇（Cortisol）抗原-BSA（货号：）标记碱性磷酸酶浓缩液	DKY1387D
皮质醇（Cortisol）抗体（货号：）标记荧光微球浓缩液	DKY1387E
AMPPD 发光底物液（即用型）	DCD0517B
APS-5 发光底物液（即用型）	ECD0532M
羧基磁性微球，1um	DEG0852A
时间分辨荧光微球，羧基（300nm）	AEG0789C
皮质醇磁珠稀释液	DCD0566B
皮质醇生物素稀释液	DCD0566B
SA稀释液	DCD0566B
皮质醇吖啶酯稀释液	DCD0566C
皮质醇碱性磷酸酶稀释液	DCD0566D
皮质醇（Cortisol）标准品稀释液	DCD0566E
链霉亲和素磁性微球，1.5um	DEG0814A-10ml
蛋白保护剂GH	DCL0009A	推荐使用浓度10%左右
复合酶保护剂AFP	ACE0074A	推荐使用浓度5%左右
酶解深水鱼皮明胶	ACH0085J	推荐使用浓度1%-10%。