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Bst DNA Polymerase 链置换酶
发布时间:2026-02-02 09:45 | 点击次数:61
Bst DNA Polymerase链置换酶
◆产品说明
本产品具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性,是一款自动从模板双链DNA的氢键解离,然后后合成新DNA链的酶。由于其特性,耐热性链置换DNA聚合酶无需DNA的双链解离,即可在恒定温度下合成DNA,且合成不受DNA二级结构的抑制。
特点
● 具有5’→ 3’DNA聚合酶活性与链置换活性
● 可在恒定温度下合成DNA
● 适用于合成GC含量高的DNA链
● 合成不受DNA二级结构抑制
应用
● 利用链置换活性的应用(等温基因扩增法等)
Bst DNA Polymerase
|
理想反应温度
|
60°C~65°C
|
|
失活时间*1
|
80°C、5 min
|
*1 将酶原液直接热变性时的失活温度
|
来源
|
Geobacillus stearothermophilus
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活性
|
8 units/μL
|
|
单位定义
|
1 unit指以小牛胸腺DNA为引物/模板,在65°C,30 min的条件下将10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物的
酶量。
|
|
储存液成分
|
10 mmol/L Tris-HCl(pH 7.5), 1 mmol/L DTT, 0.1% Tween 20, 0.1 mmol/L EDTA, 50% Glycerol
|
|
酶反应条件
|
随酶附带10×的酶反应专用缓冲液(0.5 mL×1)。如反应总体积为50 μL,添加5 μL的酶反应专用缓冲液
|
◆产品组成
Bst DNA Polymerase(1,600 units)
|
产品组分
|
容量
|
保存
|
|
Bst DNA Polymerase(8 units/μL)
|
200 μL × 1
|
-20°C
|
|
10 × Bst Reaction Buffer(80 mmol/L Mg2+)
|
500 μL × 1
|
-20°C
|
◆应用实例
实验案例1 LAMP法中的运用
LAMP法 反应条件
![]() |
3.0% Agarose 21
TAE凝胶电泳
EtBr染色
M:Gene Ladder Wide 1
1:A 公司Bst DNA Polymerase
2:本公司Bst DNA Polymerase
|
|
Candidatus Liberibacter asiaticus DNA
|
1 × 106 copies
|
|
FIP*
|
40 pmol
|
|
BIP*
|
40 pmol
|
|
F3 Primer*
|
5 pmol
|
|
B3 Primer*
|
5 pmol
|
|
Loop Primer F*
|
20 pmol
|
|
Loop Primer B*
|
20 pmol
|
|
dNTPs Mixture
|
1.4 mM each
|
|
10 × Bst Reaction Buffer
|
2.5 μL
|
|
Bst DNA Polymerase
|
8 units
|
|
Total
|
25 μL
|

反应
|
65°C
|
60 min
|
*引物序列
FIP: 5'-GCATGCCGAGGATCAATGCCTTGCTTAAAGAGCGTGCTACG-3'
BIP: 5'-TATGCCTAATGGCACGGGGGTAAGCTTCATCCGCCTTCGA-3'
F3 Primer: 5'-TGGGTTAAGTGATGCTGTGG-3'
B3 Primer: 5'-CAACAATATCAGCCCCTGCT-3'
Loop Primer F: 5'-TCTCAACTGTTTCATCAAACCTAGC-3'
Loop Primer B: 5'- CGTGGCGGTTTTTGCTACA-3'
实验案例2 RCA法评估Bst DNA Polymerase的耐热性与理想反应温度

RCA法 反应溶液组成
|
M13mp18 single strand DNA
|
40 ng
|
|
Universal primer
|
50 mM
|
|
dNTPs Mixture
|
1.4 mM each
|
|
Tris-HCl (pH 8.8 at 25°C)
|
20 mM
|
|
KCl
|
10 mM
|
|
(NH4)2SO4
|
10 mM
|
|
MgSO4
|
8 mM
|
|
Tween 20
|
0.10%
|
|
Betaine
|
0.8 M
|
|
Bst DNA Polymerase
|
4 units
|
|
Total
|
20 μL
|

反应条件
|
各个温度下
|
30 min
|
结果

条带
M: Gene Ladder Wide 1 (产品编号313-06961)
D: 模板 DNA (M13mp8 single strand, 产品编号319-00841)
引物序列(Universal Primer)
5'-GTTTTCCCAGTCACGACGTTGTA-3'
电泳条件
0.7% Agarose S / TAE凝胶电泳
EtBr染色
使用不含SDS的Loading Buffer
备注
本实验为比较两种Bst DNA Polymerase,使用相同的反应液组成进行反应。在RCA法中使用各种酶配套的专用缓冲液时,须进行预实验探究反应体系。
◆相关信息
备注
● 本产品为实验研究用试剂。不可作为医药品使用。
● 检测Candidatus Liberibacter asiaticus的LAMP引物组合是国立研究开发法人 农业、食品产业技术综合研究机构 九州冲绳农业研究中心灵活运用先进技术,在农林水产研究高度化事业“抑制顽固性疾病柑橘绿化病传播的技术开发”中开发的产品。
License
● LAMP(Loop-mediated Isothermal Amplification)法由荣研化学株式会社持有专利权。
◆产品列表
|
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
|
311-07481
|
Bst DNA Polymerase
|
1600 units
|
◆相关产品
|
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
|
319-07281
|
Csa DNA Polymerase
|
1600 units
|
|
319-07301
|
96-7 DNA Polymerase
|
1600 units
|
|
312-07271
|
dNTPs Mixture(25 mM each)
|
400 μL
|
※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。



















