石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒 ISOGEN PB Kit

本产品是石蜡包埋组织切片RNA提取试剂盒。包含从脱石蜡，Proteinase K 处理组织到利用 ISOGEN-LS 提取RNA，非常简便、短时间（约２小时）即可完成。提取的RNA可用于RT-PCR检测。

●　从石蜡包埋组织切片提取RNA

●　操作简便，且用时少（２小时）

●　提取的 RNA 可用于 RT-PCR

●　RT-PCR 检测 RNA 病毒

●　RT-PCR 检测 mRNA

●　检测石蜡包埋组织切片的 RNA 保存度等

产品	包装	备注
Proteinase K（20 mg/mL）	100 µL×1
Extraction Buffer	3 mL×1	可室温保存 Extraction Buffer 可能出现白色结晶，非质量问题。在37～50°C条件下，孵化后，结晶完全溶解后使用。
ISOGEN-LS	10 mL×1	非医疗用剧毒物 可冷藏保存（2～10°C）
Ethachinmate	60 µL×1	可冷藏保存（2～10°C）
Deoxyribonuclease（RT Grade）	20 µL×1
10× DNase（RT Grade）Buffer II	100 µL×1
Stop Solution（RT Grade）	100 µL×1
DEPC treated Water	500 µL×2	可室温保存

冷冻保存（-20°C）

●　Lemosol^® 或Lemosol^® A

●　乙醇

●　Chloroform

●　异丙醇

从石蜡包埋组织提取RNA 时， RNA 的分解持续到包埋过程，其 RNA 的完整性比从新鲜组织提取的 RNA 低。

从哺乳动物的新鲜组织提取的 total RNA 经过电泳后，检测出明亮的 28S rRNA 和 18S rRNA 条带，其比例约为 2 : 1。使用石蜡包埋组织进行提取时，无法得出这个结果。实际上，使用小鼠的石蜡包埋组织进行提取实验，几乎无法检测 28S rRNA 。因此，在包埋过程中引导RNA分解。石蜡包埋状态关系到 RNA 的分解程度。有可检测出 18S rRNA 的石蜡块，也有 18S rRNA 降解太多而无法检测出来。Nippon Gene 将判断基准设定为剩余一个 18S rRNA，in situ hybridization 等、需要高保存度RNA时，建议设定标准。

即使 RNA 已分解（包括无法确认 18S rRNA 的情况），可使用 RT-PCR 检测出基因，使用 RT-PCR 时，RNA 的完整性较好。但是使用石蜡包埋组织切片进行 PCR 时，扩增效率比一般情况的低，请注意避免引物长度设置过大（400 bp 以下，尽量设置为 200 bp以下）。

按照操作流程，从4片10 µm小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片，提取RNA ，取1/4的 量（5 µL），使用1% 福尔马林変性Agarose S 进行电泳。

从小鼠颌下腺石蜡包埋组织切片提取500 ng RNA， DNase 处理后，进行RT-PCR，检测出小鼠glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase（Gapd）基因外显子5（258 bp）。

对于无法得到提取RNA的电泳结果或10 ng 以下的情况，建议添加RT反应補助试剂RTmate，进行逆转录。

●　本产品为实验研究用试剂。请勿用于医疗用途。

产品编号	产品名称	产品规格
315-06421	ISOGEN PB Kit ISOGEN石蜡组织切片RNA提取试剂盒	20次用量