ISOPLANT II DNA快速提取试剂（植物/酵母/细菌）

ISOPLANT II 是可以迅速地从植物?酵母?细菌提取 DNA 的试剂盒。与旧产品 ISOPLANT 一样，利用 Solution II 的主要成分Benzyl chloride，对细胞壁进行破坏，在表面活性剂的作用下，使其溶解。植物组织的多糖及多酚比植物组织多，提取时常混入 DNA 中。这些物质抑制限制性内切酶反应及 PCR，难以对 DNA 进行定量测定。改良后的新产品 ISOPLANT II，可有效去除多糖及多酚等抑制物质。不仅可以从草本植物提取，还可以从难度较大的木本植物提取，提取到的 DNA 可用于 PCR 及限制性内切酶反应。

•　迅速地从植物?酵母?细菌提取基因组 DNA

•　无需使用臼等工具捣碎材料，便于处理多个样品

•　经改良，可有效去除抑制物质（多糖及多酚）

冷蔵保存（2～10°C）

若长时间不使用 RNase A ，请冷冻保存（-20°C）。除了 RNase A ，其他产品可以室温保存。

ISOPLANT II （20回分、100回分）
产品	容量（20次）	容量（100次）	备注
Wash Buffer	20 mL × 1	100 mL × 1
Solution I	6 mL × 1	30 mL × 1	可能析出白色沉淀，但不影响品质。请进行37°C左右的水浴，待结晶完全溶解后即可放心使用。
Solution II	3 mL × 1	15 mL × 1	主要成分是Benzyl chloride。Benzyl chloride为危险品，请小心使用。
Solution III-A	2 mL × 1	10 mL × 1	Solution III-A为白色悬浊液，蒸发后只剩下白色固相，请使用灭菌蒸馏水溶解。
Solution III-B	2.5 mL × 1	12 mL × 1
TE（pH8.0）	2 mL × 1	10 mL × 1	10 mM Tris-HCl（pH8.0）, 1 mM   EDTA
RNase A （1 mg/mL）	20 µL × 1	100 µL × 1	若长时间不使用RNase A ，请冷冻保存（-20°C）。

植物	酵母、细菌

1. 使用从植物叶子提取的DNA进行RAPD分析

2. 使用从植物叶子提取的DNA进行制限性内切酶反应

3. 从细菌、酶提取得DNA进行制限性内切酶反应

4. ISOPLANT II与旧产品（ISOPLANT）的纯度比较

分别使用各样品 0.1 g 冻结粉碎的叶子的1/100提取到的 DNA ，进行 RAPD 分析。

RAPD-PC
PCR Mixture			PCR条件
Template DNA	1 µL		95°C	3 min.	1 cycle
10×Gene Taq Universal Buffer	5 µL		40°C	5 min.
dNTP Mixture (2.5 mM each)	4 µL		72°C	1 min.
Arbitrary Primer(AP-A-2 primer) (10 µM)	1 µL
Gene Taq (5 units/µL)	0.25 µL		95°C	15 sec.	25 cycles
H2O	38.75 µL		40°C	2 min.
Total Volume	50 µL		72°C	1 min.
			72°C	5 min.

	lane 1. 西瓜 lane 2. 黄瓜 lane 3. 南瓜 lane 4. 玉米 lane 5. 水稻 lane 6. 葱 lane 7. 豆子 lane 8. 烟草	lane 9. 菠菜 lane 10. 银杏 lane 11. 苹果 lane 12. 牡蛎 lane 13. 桃 lane 14. 柚子 lane 15. 梅干 lane 16. 梨
	M : Marker 4 (φX174/Hae III)

Arbitrary Primer: AP-A-2(TGGATTGGTC)

Taq DNA polymerase: Gene Taq

3% Agarose 21

分别使用各样品 0.1 g 冻结粉碎的叶子的1/20提取到的 DNA，进行制限性内切酶反应（5～20 units）。

0.8% Agarose S	lane 1. 烟草 lane 2. 菠菜 lane 3. 胡萝卜 lane 4. 梨 lane 5. 水稻 lane 6. 茶 lane 7. 柚子 lane 8. 苹果
	M : Marker 2 (λ/Hind III?EcoR I) a : intact DNA b : Hind III digest + RNase A

•注意事项　提取DNA时进行 NaBH4 处理，获得上述数据。

分别取 1/20 从 1.5 mL 培养液体提取到的 DNA，进行制限性内切酶反应（5～20 units）。

0.8% Agarose S	lane 1. 粘质沙雷-氏菌　Serratia marcescens lane 2. 牛莫拉氏杆菌　Moraxella bovis lane 3. 流感嗜血杆菌C 　Haemophilus influenzae c lane 4. 普通变形杆菌　Proteus vulgaris lane 5. 裂殖酵母　Shizosaccharomyces pombe lane 6. 毕赤酵母　Pichia pastoris lane 7. 酿酒酵母　Sacaomyces cerevisiae
	M : Marker 2 (λ/Hind III?EcoR I) a : intact DNA b : Hind III digest + RNase A

使用相同的样本量，分别用 ISOPLANT II 及旧产品（ISOPLANT）从菠菜及苹果叶子提取 DNA，检测吸光度（200～300 nm）

菠菜	苹果

使用 ISOPLANT II 提取 DNA，在 260 nm 有峰值。表明 DNA 不含多糖及多酚等夹杂物，纯度较高。

本产品为实验研究用试剂，不可用于医疗或其他用途。

不了解试剂基本知识的人士请不要使用。

产品编号	产品名称	产品规格
316-04153	ISOPLANT II	20次
310-04151	ISOPLANT II	100次