生物制品质量检测方案

随着生物制药行业发展，国家对生物制品质量安全管控越来越严格。生物制品中的宿主细胞残留 DNA（HCD）、蛋白残留、支原体等杂质和污染物会削弱药效，带来安全隐患。以 HCD 为例，生物制品生产中易混入，国家药品监督管理局药品评审中心要求严控其残留量与片段大小，理想是控制在 200bp 以下，降低致瘤性和感染性风险，终产品须检测相关指标，若采用清除等方法还需方法学验证。?依据《中华人民共和国药典》2020 年版第三部，外源性 DNA 残留检测方法有 DNA 探针杂交法、荧光染料染色法和定量 PCR 法。目前，荧光探针 qPCR 法是主流 HCD 检测手段，因高灵敏度、序列特异性及准确性，为生物制药工艺研究和质量控制提供可靠数据。

CHO细胞是生物制药行业应用最广泛的细胞系。在药物表达生产过程中，不可避免的会有一些来自于宿主细胞的蛋白残留，这些残留的宿主细胞蛋白会降低药物的疗效，而且会有很大的潜在风险，在进入人体后可能会诱发严重的不良反应；因此，需要对生物药物中的宿主细胞残留蛋白进行严格检测。CHO细胞残留蛋白检测试剂盒，可快速高效的检测出样品中来自CHO细胞的残留蛋白；具有抗体覆盖率高，灵敏度高，准确性好，样品适用范围广等特点。

产品名称	规格
CHO 细胞残留蛋白检测试剂盒	96T

检测灵敏度为： 1ng/mL，线性范围为：1ng/mL-200ng/mL

抗体类药物生产时多用到的蛋白A（Protein A）亲和层析填料，不可避免会有蛋白A配基脱落，导致抗体药物中蛋白A的残留污染。本试剂盒既可检测天然的protein A，也可检测重组的protein A如MabSelect SuRe等，适用于定量分析生物药物中蛋白A杂质。

货号	产品名称	规格
DDM1416A-48T	蛋白A（Protein A） 残留检测试剂盒	48T
DDM1416A-96T	蛋白A（Protein A） 残留检测试剂盒	96T

通常情况下，蛋白A会与待测样品中的单克隆抗体形成复合体从而影响准确的蛋白A测定，与传统方法相比，本试剂盒无需样品预处理步骤，即可检测从IgG中分离的蛋白A，实验简单易操作，且耗时短。

本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫检测技术测定样品中proteinA的含量。包括校准品，标准品，稀释液，Biotin标记的检测抗体，清洗液，双组分TMB显色液，终止液，预包被酶标板，封板膜。

本试剂盒用于生物制品样本的前处理，可稳定高效地获得样本中的微量宿主细胞DNA。适用于多种基质缓冲溶液，有效提取纯化微量的DNA。本试剂盒可搭配HCD检测试剂盒共同使用，可快速高效的定量检测各类生物制品中来自宿主细胞的残留DNA。

1、除了手动提取试剂盒，还有与全自动核酸提取仪配套的自动化提取试剂盒，供不同需要的客户选择使用。

2、提取高效快速(自动化版本仅需26min)，提取效率高。

3、针对不同类型的样本，回收率在80%-120%之间，且重复性好。

产品名称	规格
宿主细胞残留DNA提取试剂盒	100reaction/盒

本试剂盒，采用qPCR荧光探针法原理，与宿主细胞残留DNA提取试剂盒搭配使用使用，可快速高效的定量检测各类生物制品及药品的中间品、半成品和成品中残留的CHO宿主细胞DNA。检测快速、特异性强、检测灵敏度高，最低检测限可以达到fg级。

产品名称	规格
CHO宿主细胞残留DNA检测试剂盒	100reaction/盒

本试剂盒线性范围为：200pg/μL-0.002pg/μL；复孔差异小，扩增效率高，检测值偏差＜15%。

经过灵敏度测试，本试剂盒定量限可达1fg/μL，具有高灵敏度。

本试剂盒，采用qPCR荧光探针法原理，与宿主细胞残留DNA提取试剂盒搭配使用使用，可快速高效的定量检测各类生物制品及药品的中间品、半成品和成品中残留的E.col DNA。检测快速、特异性强、检测灵敏度高，最低检测限可以达到fg级。

产品名称	规格
E.coli宿主DNA残留检测试剂盒	100reaction/盒

本试剂盒线性范围为：300pg/μL-0.03pg/μL；重复性好，扩增效率高；检测值偏差＜15%。

E.coli DNA 国家标准品 （pg/μL）	300	30	3	0.3	0.03
实测值（pg/μL）	309.354	29.787	2.681	0.287	0.028
偏差	3.12%	-0.71%	-10.64%	-4.33%	-6.79%

本试剂盒，采用qPCR荧光探针法原理，与宿主细胞残留DNA提取试剂盒搭配使用使用，可快速高效的定量检测各类生物制品及药品的中间品、半成品和成品中残留的毕赤酵母宿主DNA。检测快速、特异性强、检测灵敏度高，最低检测限可以达到fg级。

产品名称	规格
毕赤酵母残留DNA检测试剂盒	100reaction/盒

本试剂盒线性范围为：300pg/μL-0.03pg/μL；复孔差异小，扩增效率高；检测值偏差＜15%。

经过灵敏度测试，本试剂盒定量限可达3fg/μL，具有高灵敏度。

本试剂盒，采用qPCR荧光探针法原理，与宿主细胞残留DNA提取试剂盒搭配使用使用，可快速高效的定量检测各类生物制品及药品的中间品、半成品和成品中残留的Vero细胞DNA。检测快速、特异性强、检测灵敏度高，最低检测限可以达到fg级。

产品名称	规格
Vero残留DNA检测试剂盒	100reaction/盒

本试剂盒线性范围为：300pg/μL~0.003pg/μL；复孔差异小，扩增效率高；各浓度检测值 CV＜15%。

经过灵敏度测试，重复10次检测3fg/μL的Vero DNA，偏差＜20%，CV值均＜20%。

本试剂盒，采用qPCR荧光探针法原理，与宿主细胞残留DNA提取试剂盒搭配使用使用，可快速高效的定量检测各类生物制品及药品的中间品、半成品和成品中残留的HEK293细胞DNA。检测快速、特异性强、检测灵敏度高，最低检测限可以达到fg级。

产品名称	规格
HEK293细胞残留DNA检测试剂盒	100reaction/盒

本试剂试剂盒线性范围为：300pg/μL~0.03pg/μL；复孔差异小，扩增效率高；各浓度检测值 CV＜15%。

经过灵敏度测试，本试剂盒重复 10 次检测 30fg/μL 的 HEK293 DNA，偏差＜20%，CV 值均＜20%。

本SV40LTA&E1A 残留 DNA 检测试剂盒利用多重 PCR-荧光探针法原理，定量检测各种生物制品及药品的中间品、半成品和成品中SV40LTA和E1A 残留 DNA 的含量。检测快速、特异性强、检测灵敏度高，最低检测限可以达到 10copies/μL，试剂盒配套有SV40LTA&E1A定量参考品。本试剂盒与宿主细胞残留DNA提取试剂盒配套使用，可准确定量检测样品中残留的SV40LTA和E1A微量DNA。质粒残留检测试剂盒。

产品名称	规格
SV40LTA&E1A残留DNA检测试剂盒	100reaction/盒

本试剂盒线性范围为：10⁶copies/μL~10²copies/μL，复孔差异小，扩增效率高；检测值偏差＜15%。经灵敏度测试检出限为10copies/μL。

试剂盒利用 PCR-荧光探针法原理，定量检测基因治疗产品中质粒 DNA 残留，CAR- T 细胞治疗中慢病毒载体制备相关的质粒 DNA。检测快速、特异性强、检测灵敏度高，最低检测限可以达到 10copies/μL。试剂盒配套有质粒 DNA 定量参考品。本试剂盒与宿主细胞残留 DNA 提取试剂盒配套使用，可准确定量检测样品中残留的微量质粒 DNA。

产品名称	规格
质粒DNA残留检测试剂盒	100reaction/盒

试剂线性范围为：1.57E+06 copies/μL — 1.57E+01copies/μL ；复孔差异小，扩增效率高；各浓度检测值 CV＜15%。

样品理论浓度 （copies/μL）	1.57E+01
检测均值 （copies/μL）	1.46E+01
CV	13.51%
相对偏差	7.01%
可接受标准	相对偏差和 CV 均＜20%
结果	合格

干扰DNA	检测均值(copies/μL)	可接受标准	结果
CHO基因组DNA	5.03	检测值＜定量限 （1.57E+01cop ies/μL）	无干扰
HEK293基因组DNA	3.72		无干扰
Vero基因组DNA	4.09		无干扰
E.coli基因组DNA	4.3		无干扰
毕赤酵母基因组DNA	3.64		无干扰

经过灵敏度测试，本试剂盒的定量限为 1.57E+01copies/μL，且生产常用的工程细胞 CHO、 Vero、HEK293 和工程菌 E.coli、毕赤酵母基因组 DNA 对检测体系均无干扰。

本试剂盒适用于定量检测生物制品中残留的大肠杆菌总 RNA，通过设计特异性引物和探针，将反转录和荧光探针 qPCR 检测技术融合，实现一步法定量检测总 RNA 残留；检测快速、特异性强、检测灵敏度高，低检测限可以达到 fg 级别。本试剂盒与病毒核酸提取试剂盒配套使用，可快速准确定量检测样品中来自大肠杆菌（E.coli）的残留RNA。

产品名称	规格
E.coli RNA残留检测试剂盒（RT-PCR荧光探针法）	100reaction/盒

试剂线性范围为：试剂线性范围为：20pg/μL~0.002pg/μL；复孔差异小，扩增效率高；各浓度检测值 CV＜15%。

经过灵敏度测试，本试剂盒的定量限为 2fg/μL；重复 20 次检测 2fg/μL 的 E.coli-RNA， 偏差＜15%，CV 值均＜15%。

本试剂盒采用特别修饰的氧化硅纳米磁性微球，在独特缓冲体系和外加磁场的作用下，可从复杂生物样本中提取微量 DNA 并纯化得到高纯度 DNA。与本公司自主研发的支原体 DNA 检测试剂盒（荧光探针法）配套使用，定性检测主细胞库、工作细胞库、病毒种子批以及临床治疗用细胞中是否有支原体污染。本试剂盒还有与全自动核酸提取仪配套的自动化提取试剂盒，供不同需要的客户选择使用；提取高效快速（自动化版本仅需26min），提取效率高。

产品名称	规格
支原体DNA提取纯化试剂盒	50reaction/盒

本试剂盒用于 DNA 病毒、RNA 病毒的核酸提取，即适用于细胞样品也适用于病毒收获液。试剂盒采用特别修饰的氧化硅纳米磁性微球，在独特缓冲体系和外加磁场的作用下，可从复杂生物样本中提取并纯化得到高纯度核酸。搭配自动化核酸提取设备也可实现样品的自动化处理，操作便捷本试剂盒还有与全自动核酸提取仪配套的自动化提取试剂盒，供不同需要的客户选择使用；提取高效快速（自动化版本仅需26min），提取效率高。

产品名称	规格
病毒核酸提取试剂盒（磁珠法-手工/自动）	50reaction/盒

RCL 基因拷贝数检测试剂盒适用于定量检测慢病毒载体生产的细胞治疗产品和基因治疗产品中可复制性慢病毒 RCL，如生产病毒的细胞库、终末细胞、病毒载体及 CAR-T 细胞。 本试剂盒基于荧光探针法，采用荧光探针 RT-PCR 的方法检测慢病毒载体上特定序列。试剂盒配套有 RCL 定量参考品。本试剂盒检测快速，专一性强，性能可靠，与病毒核酸提取试剂盒配套使用，准确定量样品中可复制性慢病毒 RCL 的拷贝数。

产品名称	规格
RCL基因拷贝数检测试剂盒（RT-PCR 荧光探针法）	100reaction/盒

本试剂盒线性范围为：5×10^6 — 5×10^1 copies/μL ,复孔差异小，扩增效率高；各浓度检测值 CV＜15%。 经过灵敏度测试，本试剂盒的定量限为 10 copies/μL。

生物制药领域源细胞如CHO、NS0及BHK-21等细胞是广泛应用的工程细胞。 但是，此类细胞容易发生鼠细小病毒(Mouse Minute Virus，以下简称MMV)污染。MMV 属于细?病毒科，有四种不同的毒株（i、p、m、c）。MMV具有极强的稳定性，不易清除和灭活，有更高的安全风险，前已经成为危害生物制品安全的一个重要因素。我司提供的鼠细小病毒（MMV）检测试剂盒，采用qPCR荧光探针法原理，与病毒核酸提取试剂盒搭配使用使用，可快速高效的定性检测各类生物制品中鼠细小病毒（MMV）的污染。

产品名称	规格
鼠细小病毒（MMV）检测试剂盒	50T

本产品经梯度稀释MMV质粒参考品测试，MMV基因组DNA的基因组拷贝数在10^5 — 10^1 copies/μL时，本产品的R2=1, 扩增效率97.07%。扩增效率高，检测范围宽。

本产品经梯度稀释MMV质粒参考品测试，MMV基因组DNA的基因组拷贝数在10^5 — 10^1 copies/μL时，本产品的R2=1, 扩增效率97.07%。扩增效率高，检测范围宽。

干扰DNA	检测均值 (copies/uL)	可接受标准	结果
CHO基因组DNA	N/A	CT值＞38	无干扰
HEK293基因组DNA	N/A		无干扰
Vero基因组DNA	N/A		无干扰
E.coli基因组DNA	N/A		无干扰
毕赤酵母基因组DNA	N/A		无干扰

真菌/细菌DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法）与真菌&细菌DNA提取纯化试剂盒（磁珠法-手工/自动）配套使用，利用荧光探针法qPCR技术定性检测细胞、细胞制品、疫苗等产品中是否有真菌/细菌污染。本试剂盒覆盖多种DNA序列，检测快速，专一性强，灵敏度高，性能可靠。而且，本试剂盒参照中国药典qPCR方法检测相关要求进行验证，其检测限低至5-100CFU/mL，完全满足替代药典法的各项要求。

产品名称	规格
细菌DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法）	20T/50T
真菌DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法）	20T/50T

枯草芽孢杆菌 10CFU/mL	铜绿假单胞菌 10CFU/mL
金黄色葡萄王求菌 10CFU/mL	生孢梭菌 10CFU/mL
白色念珠菌 10CFU/mL	黑曲霉菌 10CFU/mL