生物制药表征分析工具酶

用作治病性生物药物的抗体结构复杂，异质性高，在制造过程中需要严格监管和控制。抗体分子大小异质性是抗体的生产工艺优化、生产过程控制及放行分析中重要质控指标之一。为了确保单克隆抗体及其他生物分子药物的安全性和有效性，需要对这些药物进行深入的表征分析。

随着获批的抗体药物数量逐年急剧增加，例如mAb、Fc融合蛋白、Fab、ADC、双特异性抗体和双特异性T细胞接合剂(BiTE)，了解单个翻译后修饰(PTM)可以更好地分析和预测抗体的体内功效、药代动力学和作用机制。

治病性抗体、融合蛋白等的表征通常从三个水平进行，包括自上而下的完整分子量水平、自下而上的多肽水平、亚基水平。常用作治病性蛋白理化分析的工具酶有PNGase F酶、IdeS酶、Papain、GinsKHAN、GlySERIAS酶、肽图分析用的胰蛋白酶Trypsin、GluC、LysC、糜蛋白酶Chymotrypsin等。

Seebio可提供一系抗体/蛋白理化分析工具酶，用于协助单克隆抗体、融合蛋白药物、生物类似药等生物药的表征分析及其相关翻译后修饰，助力生物药物的开发和质量控制。

蛋白酶	酶切位点	特点
重组胰蛋白酶（质谱级）	赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端	胰蛋白酶β型占比>80%；比活≥6200 USP U/mg（相当于18600 BAEE U/mg）强稳定性，冻融次数可达10次；和进口品牌比，肽段漏切率更低、蛋白鉴定数更高；批间差稳定，可提供相关法规支持文件。
重组赖氨酰内切酶(Lys-C)	赖氨酸羧基侧的酰胺、酯和肽键	可单独使用，也可与胰蛋白酶联用，鉴定更多的蛋白数以及磷酸化位点数目；在4M尿素或者0.1%SDS存在的情况下仍可保持较高的酶活性。
Glu-C蛋白酶	谷氨酸或天冬氨酸残基羧基端肽键	对于分析赖氨酸和精氨酸含量高的蛋白质，与胰蛋白酶联用可显著提高鉴定蛋白数目；适用于分离和富集磷酸化肽段；
重组人α-糜蛋白酶	酪氨酸，色氨酸和苯丙氨酸的羧基端肽键	特别适用于膜蛋白分析。

糖苷酶	名称	酶切位点	特点
唾液酸修饰	唾液酸酶(a2-3,6,8)	糖蛋白和寡聚糖上通过a2-3,a2-6,a2-8键连接的唾液酸	可同时作用于N-羟乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸。
	唾液酸酶(a2-3,6,8,9)	糖蛋白和寡聚糖上通过a2-3,a2-6,a2-8和a2-9键连接的唾液酸	可同时作用于N-羟乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸； 可以忍受0.5%-1.0%的去污剂。
N-糖基化修饰	PNGase F	天冬酰胺和最内侧的GIcNAc之间的糖苷键	适用于抗体和糖蛋白的N-糖基完全去除； 可在变性与非变性条件下切割糖蛋白。
	重组Endo H	N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构	适用于抗体或者其它糖蛋白的N-连接高甘露糖的完全去除。 存储液中不含甘油。
O-糖基化修饰	O糖蛋白酶	粘蛋白型O-连接糖(无论是否唾液酸化)的丝氨酸或苏氨酸残基	适用于O-糖基化分析； 无需唾液酸酶预先处理。

IdeS Protease和IdeZ Protease是分别来源于化脓性链球菌 (Streptococcus pyogenes)和马链球菌兽瘟亚种 (Streptococcus equi)的重组蛋白酶，该蛋白酶具有极高的底物特异性，能识别人等特定物种和特定类型的IgG，并在抗体铰链区下方的特定位点进行酶切，使IgG水解为完整的F(ab')2片段和Fc片段。IdeS/Z酶作为工具酶应用于抗体类药物的制备和结构表征分析，是用于表征治病性抗体、单克隆抗体、抗体偶联药物、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具。

名称	酶切位点	特点
IdeS蛋白酶	特异识别IgG,并在IgG下铰链区的特定位点	可将lgG水解为完整的F(ab')2片段和Fc片段。
IdeZ蛋白酶	特异识别IgG,并在IgG下铰链区的特定位点	可同时作用于N-羟乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸；可以忍受0.5%-1.0%的去污剂。

名称	酶切位点	特点
重组TEV蛋白酶（rTEV Protease）	严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。	一种用来切除融合蛋白上标签序列的常用工具酶，较EK、SUMO等蛋白酶的位点专一性更强，具有高活性和高特异性的特点。
重组肠激酶-rEK	特异性识别Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列，水解Lys C端肽键	特异性识别并切割DDDDK序列，用于去除N端融合标签。
分选酶 A	切割苏氨酸（T）和甘氨酸（G）之间的肽键，然后将切割后的蛋白羧基端与多聚甘氨酸（通常为GGGGG）受体桥连，完成锚定。	特异性识别LPXTG基序（X为任意氨基酸）。

DCE0060U	重组胰蛋白酶（质谱级，液体） Recombinant Trypsin (Mass Spectrometry Grade, Liquid)	25ug/100ug
DCE0060T	重组胰蛋白酶（质谱级，冻干） Recombinant Trypsin (Mass Spectrometry Grade, Lyophilized)	25ug/100ug
EXK0369B	重组赖氨酰内切酶 Recombinant Lysyl Endopeptidase	20ug
AXJ4266C	重组Glu-C蛋白酶(V8蛋白酶)，冻干 Recombinant Glu-C Protease (V8 Protease), lyophilized	25ug/100ug
EXJ4266F	重组Glu-C蛋白酶(V8蛋白酶) Recombinant Glu-C Protease (V8 Protease)	20ug/100ug
DCL0640B	重组人α-糜蛋白酶 Recombinant Human α-Chymotrypsin	20ug/50ug/100ug
AXJ1330B	重组金属蛋白酶Asp-N Recombinant Metalloprotease Asp-N	5ug/10ug/20ug
DBY0114B	重组羧肽酶B(rCPB) Recombinant Carboxypeptidase B, rCPB	10mg

ECE0441E	PNGaseF重组糖苷酶 PNGaseF Recombinant Glycosidase	20KU/40KU
DCE0447C	重组EndoH Recombinant EndoH	3KU/15KU
DCE1244A	重组EndoS（糖苷内切酶S） Recombinant EndoS (Endoglycosidase S)	6KU/30KU
DCE0448B	O-糖蛋白酶 O-glycoproteinase	20U/100U
DCE0448C	O-糖苷酶 O-glycosidase	2000KU/10000KU
DCE0457F	唾液酸酶 (α2-3,6,8) Sialidase (α2-3,6,8)	500U/2KU/10KU
DCE0457E	唾液酸酶 (α2-3,6,8,9） Sialidase (α2-3,6,8,9)	2KU/10KU

ECE0711A	IdeS蛋白酶 IdeS protease	700U
ECE0712A	IdeZ蛋白酶 IdeZ protease	1KU/2KU

EBY3644A	Seebio®重组烟草蚀纹病毒蛋白酶（TEV酶） Recombinant TEV Protease	1KU/5KU/10KU
ECE0720A	Seebio® 分选酶A Sortase A	50μg/100μg/1mg/支