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KANEKA KanCapA(TM) 抗体纯化树脂
发布时间:2024-02-20 08:52 | 点击次数:273
新标准 抗体纯化树脂
KANEKA KanCapA™
本产品为 Protein A 亲和层析树脂。用于从活体样本及细胞培养上清纯化免疫球蛋白及包含 Fc 段的重组抗体。
本产品由高交联纤维素微珠及新研发的耐碱 Protein A 配体构成,可用于 IgG 的亲和纯化。
◆特点
• 耐碱
• 良好洗脱条件
• 高抗体结合能力
• 可循环使用
• 便于扩增
◆关于改良 Protein A
KanCapA™ 采用的不是天然 Protein A,而是使用变异型C域5聚物的新型 Protein A。
天然 Protein A的C域结合于 Fc 段,也结合于 Fab 段,其中与VH3亚家族抗体的反应性较高。该类型的解离需要弱酸条件下洗脱。
为改善该问题,使用分子设计系统重新设计分子,研发了保持耐碱性、改善 Fab 段的非特异性结合及洗脱曲线的 Protein A。
本产品采用的 Protein A
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1. C5 聚体蛋白质
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![]() |
良好pH条件下清晰地洗脱抗体
|
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2. 较高的耐碱性
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||
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3. 减少 Fab 段的非特异性结合
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◆产品特性
KANEKA KanCapA™ 产品特性
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矩阵
|
高交联纤维
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※
1) 平均粒度为累积体积分布的中间粒度
2) 5%动态结合容量为前端分析测定(停留时间3分钟)
3) 可在强碱条件下清洗,但请避免长时间的清洗
4) 请勿冷冻
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平均粒度1)
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65-85 μm
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配体
|
Protein A,重组(抗强碱)
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结合
|
化学结合(还原胺化)
|
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动态结合容量2)
|
≧35 mg 人多克隆 IgG/mL载体
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化学稳定性3)
|
使用亲和层析通用可溶性溶媒时较稳定
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pH 范围3)
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pH 2-13
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静止清洗条件3)
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0.1-0.5 mol/LNaOH
6-8 mol/L尿素、6 mol/L盐酸胍
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流量
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最大 500cm/h(层高:20-25 cm)
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停留时间
|
≧3分钟(建议:4-6分钟)
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保存条件4)
|
20%乙醇浑浊液,1~10℃
|
◆应用
1、Fab段 纯化应用
• 利用 KANEKA KanCapA™ 的特点,可从经木瓜蛋白酶处理后的 IgG 溶液分馏 Fc 段及 Fab 段。
2、IgG 洗脱曲线(pH3.5 & pH3.0)
• 洗脱范围已优化,可清晰地分馏提纯。
3、通过强碱清洗进行树脂循环
• 进行 300 次循环处理后(0.1M NaOH溶液 15 分钟),IgG 的结合容量的减少率仍低于20%,表明其循环性能较高。
|
使用 0.1 M NaOH溶液进行循环处理后的 IgG 结合活性曲线数据
|
循环处理后(0.1 M NaOH溶液 15 分钟)的IgG回收率及 Protein A 配体的渗滤量的曲线数据
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4、动态结合容量 曲线数据
• 在4-6分钟停留时间过程中,DBC 较高。
※ 动态结合容量表示纯化样本在流动的状态下,回收程度的数值。动态结合容量较高的载体的流速较快,可回收大量目标分子,因此可以认为在短时间内有效纯化目标分子的优质载体。
KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 动态结合容量) 曲线数据
5、不同大小的树脂填充装柱的压力/流速绘图数据
填充依赖压力的计算方法是从整体压力减去系统压力。
6、KANEKA KanCapA™ 于各种大小的柱的填充效果
• KANEKA KanCapA™ 适用于各种大小的柱。
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充填方法
|
L. D.(cm)
|
高度(mm)
|
培养皿/m
|
非对称性
|
|
流动填充
|
4.4
|
200
|
5710
|
1.14
|
|
轴向力填充
|
7
|
199
|
6063
|
1.06
|
|
流动填充
|
10
|
201
|
5276
|
1.18
|
|
流动填充
|
30
|
200
|
5208
|
1.17
|
|
轴向力填充
|
45
|
233
|
4712
|
1.09
|
以下是脉冲注入数据:
可溶性溶媒:1(v/v)% 丙酮
注入量:1% 柱容量
流速:60 cm/h
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 114-01071 | KANEKA KanCapA™ | 2mL (net 1mL) | for Genetic Research |
| 110-01073 | KANEKA KanCapA™ | 10mL (net 5mL) | for Genetic Research |
| 118-01074 | KANEKA KanCapA™ | 50mL (net 25mL) | for Genetic Research |



















