人ES/ips 类器官培养 - Y27632，你选对了吗

Y-27632是一种Rho相关蛋白激酶p160ROCK的小分子抑制剂，对于p160ROCK的Ki值为140 nM，比对其他激酶，包括PKC、cAMP依赖性蛋白激酶，MLCK和PAK，作用强200倍。Y-27632通过靶向结合ROCK-1/2的催化位点，抑制其激酶活性。因此，Y-27632可以作用于Rho介导的应力纤维的形成，抑制G1-S期细胞周期进程和胞质分裂。此外，Y-27632还能够通过调节上皮-间充质过渡样诱导人多能干细胞(hIPSCs)选择性地分化为间胚层谱系。

Wako Y-27632 （CAS.NO: 331752-47-7）

FUJIFILM Wako可提供多种类型的Y-27632产品。请根据用途进行选择。

	Y-27632 (符合GMP标准)	Y-27632, MF	CultureSure® Y-27632	CultureSure® 10mmol/L Y-27632溶液,无动物来源成分
ICH-Q7	√	-	-	-
ISO9001	√	√	√	√
无菌测试	-	-	-	√
活菌数测试	√	√
无动物源性	√	√	√	√
内毒素测试	√	√	√	√
支原体阴性测试	√	√	√	√
粉末/液体	粉末	粉末	粉末	液体（已过滤除菌）

Y-27632 (符合GMP标准)	符合ICH-Q7（原料药GMP）标准，可作为再生医疗等产品商业化生产的原材料。 采用GMP设备和管理体系进行生产。 已进行活菌数测试、内毒素测试、支原体阴性测试、残留溶剂测试等。 按照GMP管理体系进行文件管理 在相当于ISO 14644-1 6级的洁净室中进行分装 使用专用的培养基添加剂生产设备，控制污染风险 实施工艺验证、分析验证和清洁验证 无动物源性
Y-27632, MF	符合ISO9001管理标准，可用作再生医疗等产品商业化生产的原材料。 使用符合自愿性标准的管理设备进行生产。已进行活菌数测试、内毒素测试、支原体阴性测试。 使用专用的培养基添加剂生产设备，控制污染风险 实施工艺验证、分析验证和清洁验证 无动物源性
CultureSure® Y-27632	为药物发现、再生医疗的基础研究而开发的无动物源性、符合ISO9001管理标准的产品。 已进行内毒素测试、支原体阴性测试。
CultureSure® 10 mmol/L Y-27632溶液，无动物来源成分	为药物发现、再生医疗的基础研究而开发的无动物源性、符合ISO9001管理标准的产品。 已进行无菌检测、内毒素检测、支原体阴性检测。 已经过0.1μm过滤器除菌，可直接加入培养基等产品中使用。

粉末状的Y-27632产品已确认可溶于水。制备至所需浓度后，请在过滤灭菌后使用。

关于ES/iPS细胞培养的常规使用方法请参考protocol：

		Y-27632产品（粉末）
		1 mg	5 mg	10 mg
制备后的浓度	1 mmol/L	2.956 mL	14.781 mL	29.562 mL
	5 mmol/L	0.591 mL	2.956 mL	5.912 mL
	10 mmol/L	0.296 mL	1.478 mL	2.956 mL
	50 mmol/L	0.059 mL	0.296 mL	0.591 mL

在类器官培养的过程中，离不开Y-27632。Y-27632是一种Rho相关蛋白激酶p160ROCK的小分子抑制剂，能够靶向结合ROCK-1和ROCK-2的催化位点，从而抑制其激酶活性。因此，Y-27632可以作用于Rho介导的应力纤维的形成，抑制G1-S期细胞周期进程和胞质分裂。此外，Y-27632能够通过上皮-间充质过渡样调节引发人诱导多能干细胞 (hIPSCs) 选择性地分化为间胚层谱系。

人肝癌类器官已在多项研究中建立，在培养的前2至3周需要Y27632。在组织学水平上，即使经过长期扩展，这些原发性肝癌类器官也能在很大程度上保留其母体肿瘤特征。

通过添加Y-27632至培养基中，可抑制人ES细胞或人iPS细胞在细胞分散时的细胞死亡，还可提高冻存后的iPSC存活率。Y-27632是一种选择性强效ROCK（Rho-associated coiled-coil forming kinase/Rho binding kinase）抑制剂，具有通过ROCK信号传递系统收缩血管平滑肌等多种功能。

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级
252-00701	Y-27632(GMP-compliant) Y-27632（GMP标准）	5mg	细胞培养用
258-00703	Y-27632(GMP-compliant) Y-27632（GMP标准）	25mg	细胞培养用
259-00613	Y-27632,MF 选择性强效ROCK抑制剂	5mg	细胞培养用
257-00614	Y-27632,MF 选择性强效ROCK抑制剂	25mg	细胞培养用
030-24021	CultureSure®Y-27632 CultureSure®Y-27632（选择性ROCK抑制剂）	1mg	细胞培养用
036-24023	CultureSure®Y-27632 CultureSure®Y-27632（选择性ROCK抑制剂）	5mg	细胞培养用
035-24593	CultureSure®10mmol/LY-27632Solution,Animal-derived-free CultureSure®10mmol/lY-27632溶液，无动物源	1mL	细胞培养用
039-24591	CultureSure®10mmol/LY-27632 Solution,Animal-derived-free CultureSure®10mmol/lY-27632溶液，无动物源	300μL	细胞培养用

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级
033-26071	CultureSure™ CEPT Cocktail(1,000×)	300 μL	细胞培养用
195-16031	StemSure® Freezing Medium StemSure® 细胞冻存液	100 mL	细胞培养用
EEM0037A	ES专用胎牛血清	500 mL	细胞培养用
064-05381	重组人成纤维细胞生长因子（碱性）(FGF-basic/bFGF/FGF2)，无动物源	50ug	细胞生物学用
068-05384	重组人成纤维细胞生长因子（碱性）(FGF-basic/bFGF/FGF2)，无动物源	100ug	细胞生物学用
060-05383	重组人成纤维细胞生长因子（碱性）(FGF-basic/bFGF/FGF2)，无动物源	1mg	细胞生物学用
ACC0076C	PBS缓冲液	500ml	细胞培养
203-20251	胰蛋白酶EDTA溶液（无酚红）,AF	100mL	细胞培养