符合GMP生产标准的全能核酸酶，高效、可重复性去除DNA

在生物制品的制备/生产过程中，去除DNA残留是极为重要的。常用的去除DNA的方法如沉淀法在DNA残留要求较高的时候难以达到，因为会发生聚集和包裹现象，影响去除效率。而酶解法在使用时需摸索较佳条件，操作繁琐，重复性差。直至全能核酸酶的出现，才能可重复性地去除DNA，保证了生物制品的高品质和高产量。西宝生物隆重推出DENARASE®全能核酸酶，采用非动物性原料，不添加抗生素，符合GMP生产标准，满足法规要求，在病毒载体疫苗等领域应用广泛。订购热线 400-021-8158。

 

DENARASE®全能核酸酶是一款来自粘质沙雷菌的基因工程内切酶，是生物制品生产工艺中常用全能核酸酶的典型代表。DENARASE®全能核酸酶能够降解所有形式的DNA和RNA(包括单链、双链、线性、超螺旋和环状DNA、RNA及基因组DNA)，形成较小的寡核苷酸（主要由2-5个碱基对组成）对核酸序列没有特异性，且没有蛋白酶活性。

分子量：27 kDa (具有两个相同亚基的单体)
适合pH：pH 8.0~9.0
适合温度：37℃
等电点：pH 6.2
辅因子：Mg²⁺

产品以液体形式提供，制剂组成：20mM Tris盐酸盐缓冲液pH8.2，20mM氯化钠，2mM氯化镁，50%甘油(v/v)。

 

• 采用革兰氏阳性的芽孢杆菌生产，降低了内毒素污染风险；
• 采用非动物性原料，不添加抗生素，符合GMP生产标准；
• 降解所有形式的DNA和RNA；
• 无蛋白酶、内毒素污染；
• 广泛的试剂兼容性；
• 超高的核酸消化活力；
• 每批次产品严格质保与功能验证。

 

项目	标准值
外观	无色透明溶液
活性*	≥250u/ul
纯度	≥99%
比活	＞6*10^5 U/mg
蛋白酶活性	未检出
内毒素水平	＜0.25EU/Ku
菌落总数	致病菌<5cfu/200ul; 霉菌&酵母<5cfu/200ul

 

制造过程符合欧盟cGMP要求。

本产品的进一步生产不使用抗生素或使用来自动物的原材料（无动物产品和BSE/TSE证书）。

 

在-20°C的储存温度下，从出厂之日起24个月内稳定。注意：不建议将产品储存在-70°C或以下，因为冷冻产品会导致活性损失。

 

• 用于疫苗的病毒或病毒样颗粒纯化：核酸酶通过去除病毒类产品外源性核酸，降低核酸残留毒性风险，提高产品安全性；
• 改善重组蛋白工艺：进行重组蛋白纯化或者自然蛋白提取研究中，第一步就需要用裂解液对其进行裂解释放蛋白，此时往往伴随着大量的基因组DNA被释放出来，很多并不是独立存在的，往往与核蛋白以复合物的形式存在，导致提取物很粘稠，呈鼻涕状。蛋白提取过程中若不能很好处理这些粘稠基因组，会造成蛋白提取效率的降低和丢失。
  若在加裂解液的同时加入一定量的DENARASE®全能核酸酶，可以很好的清除粗提物中的核酸，降低粘度，提高后续操作的效率。工程细胞裂解后加入核酸酶可降低料液的黏度，缩短处理时间，提高蛋白产量；
• 颗粒(病毒、包涵体等)预处理：核酸很容易粘附在病毒样颗粒（VLP）、病毒粒子、包涵体等细胞生成颗粒的表面，使颗粒大小或电荷发生改变，造成这些颗粒的聚集。全能核酸酶可降解核酸，避免核酸对细胞产物的影响，利于提高细胞产物纯化效率；
• 电泳和色谱样品的制备：用于ELISA、柱层析、二维电泳和印迹分析的样品制备，经核酸酶处理后可提高分辨率和回收率。

 

条件参数	适合条件	可作用条件
Mg2+	1-2   mM	1-10   mM
pH	8.0-9.2	6.0-10.0
Temp	37℃	0-42℃
DTT	0-100   mM	>100   mM
β-Mercaptoethanol	0-100   mM	>100   mM
Monovalent   cation（Na+，K+）	0-20   mM	0-150   mM
PO43-	0-10   mM	0-100   mM

 

名称	货号	规格	描述
DENARASE 全能核酸酶	TCE0358A-100K	100KU	>250   U/ul，制造和罐装均符合cGMP
	TCE0358A-500K	500KU
	TCE0358A-1000K	1000KU
	TCE0358A-5000K	5000KU
	TCE0358A-1M	1MU	>250   U/ul，制造符合cGMP，罐装符合ISO9001
	TCE0359A-5M	5MU

DENARASE全能核酸酶与EonucleaseGTP  ELISA核酸内切酶残留检测试剂盒（Cygnus，货号F960）搭配使用，更佳。

这款核酸酶检测试剂盒具有极高的灵敏度和特异性，主要用于定量检测重组病毒载体和疫苗制备过程中可能存在的内切酶杂质。哺乳动物细胞培养用于表达重组病毒载体和疫苗，这种方法成本效益高，适用于大规模生产基因治疗和疫苗生物制品。在这些产品的生产和纯化过程中，内切酶污染是一个需要重视的问题，因为内切酶常被用来清除宿主细胞的内源性DNA和RNA，以及未整合的病毒载体质粒DNA。因此，将内切酶污染降到最低至关重要。

该试剂盒利用Serratia marcescens基因工程内切酶产生的抗体和亲和纯化技术。其检测限大约为60pg/ml，提供了一种高灵敏度和特异性的检测方法，有助于纯化过程的开发、过程控制、常规质量控制以及产品放行测试。试剂盒采用简便的同步操作协议，样品中的内切酶与HRP标记的抗内切酶检测抗体在微孔板条上同时反应，而微孔板条上涂有经过亲和纯化的捕获抗内切酶抗体。

内切核酸酶试剂盒包含所有必需成分，用于检测96个样本中的内切核酸酶杂质，包括一套校准的内切核酸酶标准品。它适用于检测基因工程内切核酸酶，例如Benzonase核酸酶和DENARASE。

检测方法	ELISA
检测工具	96孔板
检测时间	约1h50min
检测限	0.06ng/ml
定量限	0.31ng/ml

产品货号	产品名称	产品规格	产品用途
F960	EndonucleaseGTP® ELISA Kit	1 kit	核酸酶残留检测试剂盒
I600	Recommended Diluent	25ml/100ml	稀释试剂

更多产品请联系我司诊断疫苗团队。