【产品推荐】链霉亲和素(Streptavidin,SA)

链霉亲和素 (Streptavidin，简称SA)具有与生物素特异结合的能力，并能与HRP、AP、磁珠等结合，且等电点比亲和素低，不含糖链，因而参与免疫学中的检测信号放大，广泛应用于ELISA、IHC、WB等实验及亲和色谱填料的制备、生物传感器、生物芯片的制作。西宝生物提供质优的链霉亲和素(Streptavidin，简称SA)，灵敏度高、特异性好、结合能力强且稳定，咨询热线400-021-8158！

1 概述：

【名称】链霉亲和素 (streptavidin，SA)

【货号】ECL0006R/ECL0006W/ECL0006

【来源】大肠杆菌重组表达

【保存条件】-20℃保存

【效期】2 年

链霉亲和素 (Streptavidin，简称SA)，是链霉菌在培养过程中分泌的一种蛋白质产物。具有与生物素特异结合的能力，结合常数高达1015M。同时，由于链霉亲和素等电点比亲和素低，且不含糖基链，故在检测中的灵敏度和特异性都高于亲和素，建立在此基础上的生物素-链霉亲和素系统的应用比生物素-亲和素系统有更大优势。

2 结构：

常规链霉亲和素是四聚体蛋白，大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度特异性地与四分子生物素结合，两者之间的亲和力极为强烈，链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于10 mol/L数量级，这一性质常用于分子生物学用途。其中一条完整的SA肽链中有159个氨基酸残基，分子量为16450。

3 质量指标：

Purity	≥95%
Specific activity	≥16.0U/mg protein
Shape and properties	White lyophilized powder

4 用途：

链霉亲和素可偶联HRP、AP、生物素及磁珠等，参与免疫学中检测信号的放大，广泛应用于ELISA、IHC、WB等实验及亲和色谱填料的制备、生物传感器、生物芯片的制作。

辣根过氧化物酶标记的链和亲霉素
1) 由高纯度的链霉亲和素和辣根过氧化物酶，通过特殊的偶联技术生产；
2) 保持了过氧化物酶的高比活性。
应用于：免疫组化（IHC）、免疫细胞化学（ICC）、原位杂交（ISH）等领域。

碱性磷酸酶标记链霉亲和素
1) 适合于固相分析，组织/细胞染色系统和印迹应用，选择特定的共价连接；
2) 缀合物稳定并高活性。
应用于：免疫组化（IHC）、免疫细胞化学（ICC）、酶联免疫斑点法（ELISPOT）、酶联免疫吸附法（ELISA）、原位杂交（ISH）及印迹应用。

荧光素标记链霉亲和素
1) 在免疫荧光、原位杂交或流式细胞术等应用中可用于检测生物素化的二抗和其他大分子；
2) 高度纯化并具有很低的非特异性结合特性；
3) 对生物素具有较高的亲和力；
应用于：免疫荧光（IF）、原位杂交（ISH）、流式细胞术（Flow Cyt）。

将链霉亲和素直接或间接预包被在酶标板上，稳定性高，易于保存，使用时只要加入生物素化的抗体或者抗原即可。

链霉亲和素标记磁珠（Streptavidin Magnetic Beads）在生命科学领域如：生物制药、体外诊断领域都有着广泛的用途

1）在基础科研中，链霉亲和素磁珠是进行分子分离、纯化和相互作用研究的核心工具（核酸提取与纯化、免疫共沉淀、细胞分选等）

2）在体外诊断领域，链霉亲和素磁珠主要作为固相载体，用于构建高灵敏度的免疫分析试剂，特别是化学发光免疫分析。

3）在药物研发和生产过程中，磁珠用于质量控制、工艺优化和靶点验证

5 应用领域：

6 注意事项：

1、冻干粉溶解后应避免反复冻融，建议分装成小包装后分别冻存;
2、溶解后立即使用效果好，不能4°C长期存放;

7 实验举例&操作步骤：

1、用碳酸钠缓冲溶液（pH 9.6）溶解冻干粉，将浓度稀释成3-10μg/ml（客户可设定梯度进行实验）
注意：由于SA等电点是7.4，包被不建议使用中性缓冲液
2、用移液器吸取100μl/孔，4℃过夜包被或者37℃包被2h；
3、洗涤：倒尽板孔中液体，加200μl洗涤液，静放三分钟，反复三次，将反应板倒置在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽，扣干
4、后续进入封闭、洗涤、抗原抗体结合流程
若不立即进入下游实验，包被板需要进行烘干保存时。包被前，将包被液中加入20%蔗糖作为活性保护剂。

2.1 NHS 活化
1、充分混匀磁珠后，取100μl 羧基磁珠到1.5 ml 离心管中，置于磁性分离上，待固液分离后去除上清液；
2、取200μl MES溶液（25mM，pH 5.0）加入到离心管中，置于磁性分离上，待固液分离后去除上清液。重复该步骤1 次；
3、迅速加入新配制的50μlEDC溶液和50μl NHS 溶液（均为50mg/ml，以上述MES配制）到装有磁珠的离心管中，漩涡混匀使磁珠充分悬浮，室温下垂直混合30min；
4、反应结束后，加入100μl 上述 MES 溶液洗涤 2 次；（活化状态不宜长时间保存，建议立即进行偶联）

2.2 蛋白偶联
1、将离心管置于磁性上，分离去除上清液，加入100μl蛋白溶液（25 mM MES，pH 5.0）
轻柔地混匀；（蛋白浓度在0.1-2.0mg/ml）
2、在室温下垂直混合反应2h，或在4℃条件下垂直混合过夜；
3、反应结束后将离心管置于磁分离架上，磁性分离去除上清液，加入1ml乙酉享胺溶液（3M，pH9.0）洗涤磁珠 2 次；
4、加1ml乙酉享胺溶液（3M, pH 9.0）于离心管中，涡旋30s，将离心管置于垂直混合仪中室温反应1-2h；
5、反应结束后，将离心管置于磁力架上，待固液分离后移除上清液，然后加入100μl纯化水轻柔涡旋 30s，磁吸分离，重复该步骤 1 次；
6、加入适量的保存液保存于4°C，如果固定的生物配体稳定，可以在保存溶液中加入0.02%（W/V）Sodium azide作为抑菌剂。

8 产品订购

产品编码	产品名称	规格	应用
ECL0006V	重组链霉亲和素	10mg，100mg，1g	野生型序列的链霉亲和素，可以偶联磁珠，酶标记，胶体金、微球、量子点标记等等用途。
ECL0006R	核心链霉亲和素	10mg，100mg，1g	重组核心链霉亲和素，去除与活性无关的序列，仅保留与活性有关的核心序列，稳定性、溶解性等方面均有提高。
ECL0006W	链霉亲和素（含半胱氨酸）	10mg，100mg，1g	重组核心链霉亲和素在C端添加了半胱氨酸，载体中的目的基团会优先与Cys共价结合，以达到定向键合目的。
ECL0006Y	链霉亲和素(5型)	10mg，100mg，1g	专用于磁珠偶联、微球标记、高亲和力，高活性，提高信号值。

9 相关产品列表：

货号	中文品名	英文品名	规格
ECE0066Z	辣根过氧化物酶	Peroxidase(HRP)	10mg,100mg,1g
DCE0108L	Seebio® 重组碱性磷酸酶（高活性）	Phosphatase, Alkaline	10mg,100mg
DCE0005A	3,3'5,5'-四甲基耳关苯月安盐酸盐	TMB-2HCl	1g,5g,25g
DCD0003A	4-石肖基苯基磷酸二钠盐,六水	PNPP-2Na	1g,5g,25g
DCD0005B	邻苯二月安片剂	OPD Tablets	100 piece
ECL0019G	重组蛋白A	Recombinant Protein A	1mg/10mg/100mg
ECL0020C	重组蛋白G	Recombinant Protein G	1mg/10mg/100mg
ECL0021B	重组蛋白A/G	Recombinant Protein A/G	5mg
ECL0018C	重组蛋白L	Recombinant Protein L	1mg/10mg
AAS0038A	EDC盐酸盐	EDC-HCl	5g/25g