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酵母(S.cerevisiae )直接转化试剂盒
发布时间:2014-11-03 16:14 | 点击次数:660
酵母(S.cerevisiae )直接转化试剂盒
本品为出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)转化试剂盒。无需预先进行菌体离心、洗净操作,可直接向酵母培养液加入目标质粒和专用试剂,是一步即可完成转化的试剂。值得一提的是利用96孔板可导入多种检体,简单加入4850种重组体也成为可能,因而可进行染色体的筛选。
[特点]
·加入了目标质粒和专用试剂的一步完成型。
·感受态细胞无需调制。
·使用96孔板可进行多检体处理。
·适应HT的低粘性试剂。
·加入了目标质粒和专用试剂的一步完成型。
·感受态细胞无需调制。
·使用96孔板可进行多检体处理。
·适应HT的低粘性试剂。
[转化效率]
向BY4737株导入pRS316时的转化效率。
向BY4737株导入pRS316时的转化效率。
|
|
形质转化效率 (cfu/μg)
|
|
软管法
|
≥5,000
|
|
96孔感光板法
|
≥500
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[试剂盒内容]
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|
20次用
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100次用
|
500次用
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|
Sc Transformation Reagent
|
500μl
|
2.5ml
|
12.5ml
|
|
Carrier DNA(5μg/μl)
|
50μl
|
250μl
|
1.25ml
|
[操作方法]
■软管法
■
<酵母的培养>
2ml YPD培养基
↓←菌种接入,调制至OD600:0.01
↓←取1ml至14ml的试管中
↓←在28~30℃振荡培养,至OD600:3.5~5.0
培养酵母液……(A)
2ml YPD培养基
↓←菌种接入,调制至OD600:0.01
↓←取1ml至14ml的试管中
↓←在28~30℃振荡培养,至OD600:3.5~5.0
培养酵母液……(A)
<转化>
1.5ml的离心管
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
↓←加入25μl培养酵母液(A)在42℃恒温箱中放置2小时
↓←加入150μl灭菌水
1.5ml的离心管
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
↓←加入25μl培养酵母液(A)在42℃恒温箱中放置2小时
↓←加入150μl灭菌水
预处理
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3天
转化后的酵母
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3天
转化后的酵母
■
96孔板法
96孔板
↓←加入25μl YPD培养基
菌种接入
↓在28~30℃情况下静置培养18~24
菌体悬浊
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
在37℃的恒温箱中放置2小时
5~10μl spotting
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3日
转化的酵母
*质粒·试剂混合液 (25μl /管, 25μl/孔)
↓←加入25μl YPD培养基
菌种接入
↓在28~30℃情况下静置培养18~24
菌体悬浊
↓←将25μl质粒和试剂混合液混合
在37℃的恒温箱中放置2小时
5~10μl
↓在28~30℃的恒温箱中放置2~3日
转化的酵母
*质粒·试剂混合液 (25μl /管, 25μl/孔)
|
·Sc Transformation Reagent…20μl
·质粒DNA………………………1μg ·Carrier DNA……………………2μl |
[保存条件]
-20℃保存
[产品资料]
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产品编号
|
品名
|
规格
|
容量
|
|
296-62701
|
S.Cerevisiae Direct Transformation Kit, Wako 酵母(S.cerevisiae )直接转化试剂盒
|
基因研究用
|
20次用
|
|
292-62703
|
100次用
|
||
|
290-62704
|
500次用
|
上海西宝生物科技有限公司
张经理
邮箱:info@seebio.cn
电话:400-021-8151


















